电针廉泉穴对大鼠延髓腹外侧区吞咽神经元的影响研究

来源 :广州中医药大学 | 被引量 : 10次 | 上传用户:Aslaen
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吞咽是最复杂的躯体反射之一,在正常的生命活动中起重要的作用,吞咽功能的正常进行,需要大脑皮层、丘脑、延髓、颅神经和外周神经以及肌肉等组织器官的高度密切配合完成。其中,脑干吞咽中枢模式发生器(CPG)的完整性在吞咽功能的正常活动中起重要的作用,CPG包括了三个部分,孤束核(NTS)及周围的网状结构、疑核(NA)以及疑核上的延髓腹外侧区(VLM)部分。延髓腹外侧区作为脑干吞咽中枢模式发生器中的重要组成部分,在正常吞咽活动中起重要的作用,本研究探讨电针廉泉穴对延髓腹外侧区吞咽相关神经元的调节作用,观察电针廉泉穴对吞咽功能的调节作用的部分作用机制。目的:应用电生理、分子生物学技术观察在生理状态下电针廉泉穴(与内关穴对照)对延髓腹外侧区吞咽相关神经元的影响;观察定向损毁延髓腹外侧区后电针廉泉穴对吞咽活动的影响,探讨延髓腹外侧区在电针廉泉穴调节吞咽功能中的作用,揭示电针廉泉穴治疗中风后吞咽障碍的部分机制。实验一电针廉泉穴对延髓腹外侧区吞咽中间神经元的影响方法:选用SD大鼠36只,雌雄不限,麻醉后进行颈部手术和颅脑开窗,记录下颌舌骨肌肌电放电和延髓腹外侧区神经元的放电,同时通过饮水装置,以双纯水诱发吞咽活动,确定延髓腹外侧区吞咽中间神经元,再分别电针廉泉穴和内关穴,观察电针对延髓腹外侧吞咽相关神经元放电的影响,结束后进行组织学鉴定。结果:组织学鉴定,记录位置正确的神经元共72个,其中有60个吞咽相关神经元和12个非吞咽相关神经元,电针廉泉穴增加大鼠的吞咽次数(15.8±0.57)明显高于电针内关穴(12.22±0.59),(P<0.01);对电针廉泉穴起反应的神经元反应率为81.7%,明显高于内关穴(50%,P<0.01)。电针廉泉穴和内关穴每秒神经元放电频率分别增加10.30±1.99和5.56±1.32,50%的神经元对电针廉泉穴起兴奋效应,而内关穴只有28.3%;神经元对电针廉泉穴和内关穴起抑制性效应的反应率分别是37.1%和21.7%,而电针廉泉穴放电频率每秒减少9.86±1.71,内关穴减少为6.17±1.77,两者比较均有统计学意义(P<0.01)。实验二电针廉泉穴对延髓腹外侧区c-fos表达的影响方法:选取SD大鼠24只,随机分为廉泉穴组、内关穴组和空白对照组,麻醉后,廉泉穴组和内关穴组电针穴位20min,电针参数为2Hz,1mA,电针结束后进行灌注取材,进行免疫荧光检测,结果使用Image-J进行阳性细胞数目统计。结果:延髓腹外侧区c-fos阳性细胞表达数目,电针廉泉穴为20.63±2.35,电针内关穴为14.13±1.78,与空白组对比,廉泉穴组和内关穴组的c-fos表达有显著的增加,廉泉穴组比内关穴组明显(P<0.01)。实验三:损毁延髓腹外侧区核团对电针廉泉穴调节吞咽活动的影响方法:选取SD大鼠20只,随机分为实验组和对照组,实验组进行微量注射鹅膏覃氨酸,对照组注射等量的生理盐水,同时记录下颌舌骨肌肌电,注射结束后电针廉泉穴和内关穴,观察下颌舌骨肌肌电的反应,与注射鹅膏覃氨酸前电针廉泉穴对下颌舌骨肌的影响做比较,注射结束后再进行组织学定位。结果:注射鹅膏覃氨酸前,电针廉泉穴能引起下颌舌骨肌肌电的变化,注射鹅膏覃氨酸对延髓腹外侧区进行了损毁后,电针廉泉穴、内关穴,下颌舌骨肌肌电均无变化;对照组注射生理盐水,电针廉泉穴和内关穴能引起下颌舌骨肌肌电放电。结论:电针廉泉穴、内关穴均能明显激活延髓腹外侧区吞咽相关神经元,廉泉穴比内关穴更明显;电针廉泉穴能使c-fos在延髓腹外侧区核团内表达增多,电针廉泉穴比电针内关穴多,在损毁延髓腹外侧区后,电针廉泉穴对吞咽活动无调节作用,提示延髓腹外侧区在电针廉泉穴调节吞咽功能中的重要作用,揭示了电针廉泉穴调节脑干部分吞咽相关核团神经元的活动,是针灸治疗卒中后吞咽障碍的主要机制之一。
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