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本研究以新疆红枣为试验材料,研究的主要内容为:建立一套快速、准确、灵敏的分析红枣中cAMP的UPLC方法;超声波辅助高效提取cAMP方法研究;提取物高效酶解与cAMP释放技术研究;cAMP分离纯化工艺方法的研究。结果如下:1.大枣环磷酸腺苷(cAMP)超高效液相色谱(UPLC)的色谱条件为:色谱柱:pH2-11,ZORBAXExtend C182.1×100mm1.8-Micron Rapid Resolution HD2.1×100mm1.8-Micron,流动相:V (甲醇):V(0.1mol/L磷酸二氢钾)=20:80;流速1.0mL/min,柱温25℃,进样量10uL,最佳检测波长258nm。实验结果表明:标准曲线线性良好,加标回收率为100.24%,标准偏差为0.92%。该方法简便、灵敏,重现性好,能够快速测定大枣中cAMP的含量。2.建立一种基于超声波辅助提取红枣中环磷酸腺苷(cAMP)的方法。以料液比、超声波功率、处理时间、超声处理方式为提取参数,按照单因素实验确定参数变化水平区间,cAMP提取率为响应值,采用中心组合设计的响应面分析法优化参数,结果表明,cAMP最佳提取工艺参数为:料液比1:15.5、超声波功率314W、处理时间11.7min、超声处理方式1.08min,cAMP提取量为502.2ug/g,提取率为96.80%。3.大枣提取液中多糖的存在对cAMP提取率存在较大的影响。通过果胶酶的水解作用,在120min附近cAMP提取率达到峰值,pH变化区间为pH4.24-pH4.18,呈弱酸性稳定环境。4.利用AB-8型大孔吸附树脂除去大枣提取液中色素、多糖等杂质,优化参数为:上样液最佳pH4、浓度为20ug/mL、上样流速为2mL/min,上样液最大体积为300mL;采用40%乙醇溶液作为洗脱剂,洗脱剂流速2mL/min,洗脱剂最大用量为160mL,收集洗脱液接近为无色。5.利用D-290型大孔吸附树脂对cAMP进行分离纯化。试验中选取上样液浓度、上样液流速、洗脱液浓度、洗脱液流速4个单因素进行L934的正交试验。确定最佳工艺参数为:上样液浓度400ug/mL,上样液流速2.5BV/h,洗脱液采用浓度为(0.1mol/L)HCl-(0.4mol/L)NH4Cl溶液,洗脱液流速2.5BV/h。在此优化条件下,cAMP纯化率为42.29%,cAMP含量为212.38ug/g。