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研究目的/背景肺癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一,也是癌症相关死亡的主要组成部分。非小细胞肺癌(NSCLC)的发病率约占肺癌的80%左右,其又包括腺癌,鳞状细胞癌和大细胞癌。由于缺乏早期诊断,约75%的患者发现时已处于中晚期,5年生存率很低。因此,有必要对NSCLC发生发展的分子机制有更全面的认识,以寻找可靠有效的治疗靶点和早期生物标志物。环状RNA(circRNA)属于新型的内源性非编码RNA,没有5’-3’极性或多聚腺苷化的尾巴,具有共价闭环结构,并且对RNA酶具有很高的抗性,在致癌作用中起关键作用。Circ-ZKSCAN1(hsa＿circ＿0001727)已被证明是依赖肿瘤的circRNA。但是,它在NSCLC中的作用尚未被报道。研究方法我们使用了qRT-PCR法确定了circ-ZKSCAN1在NSCLC样本和细胞系中的表达水平,结合临床病理资料和随访数据进行分析和预后关系。我们使用了生物信息学软件circbank、Circ Interactome、TargetScan和Miranda来预测circRNA-mi RNA和miRNA-mRNA的相互作用。我们制备了siRNA瞬转A549细胞和H1299细胞后,利用CCK-8测定法和集落形成实验测定基因与细胞增殖关系;使用划痕愈合法和Transwell测定法评估细胞迁移和侵袭;利用流式细胞数检测肿瘤细胞凋亡;通过RNA下拉实验和荧光素酶报告基因分析法分析了NSCLC细胞中circ-ZKSCAN1和miR-330-5p的相互作用关系。利用蛋白印迹法确定了miRNA和下游蛋白及通路的调控关系;免疫组化实验评估肿瘤中Ki67含量及细胞增殖能力。最后,通过裸鼠皮下成瘤异物种植实验验证了circRNA和肿瘤生长大小的关系。结果结果表明,Circ-ZKSCAN1在NSCLC中组织和细胞系中表达明显上调,与NSCLC的恶性特征和不良预后密切相关,并与肿瘤大小和临床分期有关。随后的实验表明,Circ-ZKSCAN1在体内外均能抑制NSCLC细胞的生长。重要的是,Circ-ZKSCAN1可以作为致癌mi R-330-5p的海绵,上调FAM83A的表达,进而抑制MAPK信号转导通路,从而促进NSCLC的进展。有趣的是,Circ-ZKSCAN1过表达导致FAM83A表达增加,进而促进Circ-ZKSCAN1的表达。结论及意义Circ-ZKSCAN1是NSCLC发生发展的关键正向调控因子,阐明了Circ-ZKSCAN1/miR-330-5p/FAM83A反馈环促进NSCLC进展,是理想的早期诊断和潜在的治疗靶点。