积雪草富含三萜类化合物,其中大部分是羟基积雪草苷,贵州具有丰富的积雪草药材,为了充分利用积雪草药材,本研究以积雪草为原料,首先,确定羟基积雪草苷的含量测定方法,其次,通过L9（34）正交试验确定最佳提取工艺,然后,通过大孔吸附树脂、氧化铝、结晶和制备型高效液相等方法制备出含量大于95%的羟基积雪草苷,最后,采用积雪草提取物制备出烫伤喷雾剂,并进行稳定性研究及质量标准初拟,主要研究内容如下:1.羟基积雪草苷的含量测定方法:通过查阅相关文献,进行方法学考察,优化了羟基积雪草苷HPLC含量检测方法:Agilent 1260色谱仪,Neptune C18（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相乙腈-0.2%磷酸水（0 min 25:75→20 min 25:75→30 min 30:70→40 min 40:60→50 min 50:50）,检测波长:206 nm,柱温:25℃,流速:1.0 m L/min,进样量:10μL。通过阴性对照,说明辅料对喷雾剂中羟基积雪草苷含量测定无干扰,表明积雪草中羟基积雪草苷含量测定方法适用于烫伤喷雾剂含量测定。2.积雪草中羟基积雪草苷的提取工艺研究:采用L9（34）正交试验法确定最佳提取工艺,筛选出最佳提取工艺为乙醇浓度为50%,料液比为1:20,提取温度为30℃,提取时间为2 h,提取1次,在此条件下羟基积雪草苷提取量可达到5.63 mg/g,提取率为88.33%。3.积雪草中羟基积雪草苷的纯化工艺研究:首先,大孔吸附树脂纯化羟基积雪草苷参数为:上样量为19.8 mg/g,上样流速1 BV/h,乙醇洗脱体积分数50%,乙醇洗脱体积4 BV,树脂径高比1:6,柱分离后提取物中羟基积雪草苷含量可提高至27.37%。其次,采用氧化铝对其进行脱色纯化,其脱色工艺参数为:层析剂100-200目酸性氧化铝,洗脱剂为30%乙醇,洗脱体积3 BV,积雪草提取物重量与酸性氧化铝用量比为1:10。然后,进行羟基积雪草苷提取纯化的中试研究,结果表明,得到的积雪草提取物中羟基积雪草苷含量可达54.52%以上,得率达2.24%以上,回收率达63.57%以上,三批次调试结果证明工艺重复性好,产品质量较稳定。最后,采用结晶方法进行纯化,筛选结晶溶剂为50%甲醇,结晶料液比为1:5。晶体中羟基积雪草苷含量达85%以上,羟基积雪草苷晶体再采用制备型高效液相色谱仪分离,条件为LC-20AR色谱仪,Shim-pack-GIS C18制备柱（20 mm×250 mm,5μm）,流动相为乙腈-水（0 min25:75→30 min 25:75→50 min 30:70→80 min 30:70）,检测波长:206 nm,流速:3.0 m L/min,进样量:500μL;得到的羟基积雪草苷单体纯度大于98%。4.烫伤喷雾剂制备工艺研究:通过工艺研究及辅料筛选,最终确定烫伤喷雾剂的配方及制备工艺为:精密称取积雪草提取物1.0 g,加入10 g 60%乙醇,振荡溶解;然后加入0.5 g吐温-80和6 g 1,2-丙二醇,再加入0.2 g苯甲酸,搅拌溶解;加入适量檀香香精,加纯化水至100 m L,过滤,加入氢氧化钠溶液调节p H至4.5～6.5,摇匀,灭菌、分装、密封,即得。进行质量标准研究,对3批烫伤喷雾剂进行高温、高湿以及光照试验,数据表明高温及高湿对烫伤喷雾剂无影响;但是光照会使羟基积雪草苷含量降低,积雪草苷含量升高,因此,对烫伤喷雾剂进行避光包装;加速稳定性试验结果表明,检查项目均无明显变化,稳定性良好;综上,建议烫伤喷雾剂应避光,密封存放,保存时间为一年。本试验不仅研究了一条连续提取纯化羟基积雪草苷的工艺路线,而且还制备出了烫伤喷雾剂,工艺稳定可行。优化的羟基积雪草苷的HPLC检测方法,与积雪草苷-B较好分离,提取分离纯化工艺连续且操作简单,烫伤喷雾剂稳定性良好。