间接共培养人髌下脂肪垫干细胞与骨关节炎软骨细胞的实验研究

来源 :湖南师范大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:lishicun2000
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目的将人髌下脂肪垫干细胞(IPFPSCs)及骨关节炎软骨细胞(OACs)进行间接共培养,促进OACs软骨表型的恢复及诱导IPFPSCs向软骨细胞分化。方法体外分离、培养人IPFPSCs及OACs,分为单独IPFPSCs组、单独OACs组及IPFPSCs和OACs间接共培养组,体外成软骨诱导21 d后,通过HE染色、Alcian蓝染色、免疫荧光细胞染色检测细胞的形态学,1型胶原蛋白(Coll)、Col2、CollO、聚集蛋白聚糖(aggrecan)及SOX-9的表达情况(各组细胞成软骨诱导分化情况)。结果共培养组OACs聚集成微球,IPFPSCs呈椭圆形;单独组OACs聚集分布,排列松散,单独组IPFPSCs呈长梭形。HE染色显示共培养组OACs聚集成团,核染色深,IPFPSCs呈椭圆形,胞质丰富,呈旋涡状生长;单独组OACs聚集分布,核染色浅;单独组IPFPSCs呈长梭形,核染色浅。阿尔新蓝染色显示共培养组OACs及IPFPSCs蛋白多糖分泌多,单独OACs及IPFPSCs组分泌少。免疫荧光染色显示共培养组IPFPSCs及OACs中Co12、aggrecan及SOX-9表达较强,Col 1与Co110表达较弱;而单独培养的IPFPSCs及OACs组则相反。结论IPFPSCs和OACs间接共培养可以促进OACs软骨细胞表型的恢复及诱导IPFPSCs向软骨细胞分化。
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