LC-MS/MS测定牛蛙可食性组织中敌百虫、敌敌畏方法研究

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有机磷农药具备药效高、广谱、成本低、种类多等优点,在农业生产方面有着较为普遍的应用。敌百虫(Trichlorfon)和敌敌畏(Dichlorvos)均属于有机磷农药,普遍用于农作物病害虫的防治,畜牧以及水产体内外寄生虫的预防和治疗。如果动物可食性组织中有残留这两种药物,长期食用会给人类健康带来潜在的危害。因此,在敌百虫、敌敌畏的用药过程中,其药物及代谢产物在可食性组织中的残留对人、畜的安全是不可忽视的。通过对比国内外动物性食品中敌百虫与敌敌畏的限量规定,国内敌百虫的限量规定低于食品法典委员会、美国、韩国。国内与国外敌百虫的残留限量分别为0.05 mg/kg、0.1 mg/kg。但敌敌畏的残留限量规定在国内外都为0.02 mg/kg。按照我国农业部235号公告,敌百虫和敌敌畏在动物可食性组织的最高残留限量分别为0.05 mg/kg、0.02mg/kg。牛蛙肌肉、皮肤用1%冰乙酸-乙酸乙酯提取液重复提取,经离心后合并两次上清液,置45℃水浴锅旋转蒸发约1 mL,用酸性氧化铝柱去除杂质,收集的上清液与淋洗液置45℃水浴锅旋蒸挥干,经1 mL色谱乙腈复溶,过膜,用LC-MS/MS检测。通过上述前处理方法,敌百虫的峰面积与浓度在0.5~100μg/kg范围线性关系良好,相关系数大于0.99。敌敌畏的峰面积与浓度在0.5~40μg/kg范围线性关系良好,相关系数大于0.99。在该前处理方法下,根据敌百虫和敌敌畏的最大残留限量规定分别做低、中、高三个浓度的水平添加实验,实验测得敌百虫在牛蛙肌肉中的添加回收率、批内变异系数、批间变异系数分别为:84.1%~102.5%、2.1%~12.2%、10.3%~11.6%;敌敌畏在牛蛙肌肉中的添加回收率、批内变异系数、批间变异系数分别为:79.2%~98.8%、2.9%~16.8%、9.9%~14.7%。敌百虫在牛蛙皮肤中的添加回收率、批内变异系数、批间变异系数分别为:73.5%~99.7%、4.8%~10.5%、9.0%~9.4%。敌敌畏在牛蛙皮肤中的添加回收率、批内变异系数、批间变异系数分别为:70.0%~100.0%、4.8%~12.3%、9.1%~17.3%。此外,测得敌百虫和敌敌畏在牛蛙肌肉中的检测限(Limit of Detection,LOD)与定量限(Limit of Quantification,LOQ)分别为:0.4μg/kg、0.5μg/kg;0.25μg/kg、0.5μg/kg;敌百虫和敌敌畏在牛蛙皮肤中的检测限(Limit of Detection,LOD)与定量限(Limit of Quantification,LOQ)分别为:0.4μg/kg、0.5μg/kg;0.25μg/kg、0.5μg/kg。实验结果表明,本研究所建立的LC-MS/MS检测敌百虫和敌敌畏两种药物的检测方法,检测快速、灵敏度高、重复性好,符合兽药残留分析的要求。
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