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第一部分：龙血素B对实验性肝纤维化的干预作用及可能机制研究目的：探讨龙血素B对实验性肝纤维化的治疗作用,并提出可能的机制,为下一步研究奠定基础。方法：60只清洁级健康雄性SD （Sprague-Dawley）大鼠,体重（200±10）g,随机分为4组：空白组、模型组、低剂量组、高剂量组；采用硫代乙酰胺（Thioacetamide,TAA）诱导的大鼠肝纤维化（Liver fibrosis）模型,观察龙血竭的主要成分龙血素B （Loureirin B）对肝纤维化大鼠肝脏体重比、血清转氨酶（ALT、AST）、纤维化标志物（HA、LN）、肝脏组织病理学、羟脯氨酸（Hydroxyproline, Hyp）的改变。结果：与模型组相比,（1）治疗组体重升高（P<0.05）,肝体比下降（P<0.05）；（2）肝脏组织病理METAVIR分级,低剂量组、高剂量组均优于模型组；肝纤维化半定量评分结果,低剂量组、高剂量组炎症活动度计分均下降,但仅高剂量组炎症活动度计分下降有统计学意义（P<0.05）；纤维化程度计分低剂量组下降（P<0.05）,高剂量组显著下降（P<0.01）；（3）高剂量组ALT、AST水平显著下降（P<0.01）,而低剂量组ALT、AST下降有统计学意义（P<0.05）；（4）高剂量组HA、LN水平显著下降（P<0.01）,而低剂量组HA、LN下降（P<0.05）；（5）低剂量组肝组织Hyp含量下降（P<0.05）,高剂量组Hyp含量显著下降（P<0.01）；（6）与空白组相比,模型组各项指标均有明显差异性（P<0.01）。结论：成功建立TAA诱导的大鼠肝纤维化模型；龙血素B可以有效改善肝纤维化大鼠的生存质量；龙血素B具有保护TAA诱导的肝纤维化大鼠肝功能、减轻肝细胞炎症与纤维化程度、降低组织Hyp含量的作用；这可能是其抗肝纤维化的机制之一；龙血素B对肝纤维化的治疗效果可能与给药剂量存在正相关。第二部分：龙血素B对肝纤维化大鼠肝组织氧化应激损伤保护作用的初步研究目的：通过观察龙血素B对肝纤维化大鼠肝组织氧化应激损伤保护作用,探讨其抗肝纤维化的可能机制。方法：以试剂盒检测各组大鼠肝组织超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（Glutathione peroxidase, GSH-Px）活力和丙二醛（Malondialdehyde, MDA）含量；免疫印迹法（Western blotting）检测各组大鼠肝组织中α-平滑肌肌动蛋白（α-Smooth muscle actin,α-SMA）表达的变化；逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）各组大鼠肝组织肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor-α, TNF-α）,过氧化物酶体增殖物激活受体-α（Peroxisome proliferator-activated receptor-alpha, PPAR-a） mRNA基因表达的变化结果：与模型组相比,（1）高剂量组大鼠肝组织SOD、GSH-Px活力较空白组有降低,但仍高于模型组（P<0.05）,高剂量组MDA含量下降（P<0.05）；（2）免疫印迹法结果显示,高、低剂量龙血竭治疗组均可下调了α-SMA蛋白的表达,但是只有高剂量组才统计学差异（P<0.05）；（3）治疗组均下调TNF-a mRNA表达水平,但仅有高剂量组有差异统计学意义（P＜0.05）；治疗组PPAR-a mRNA表达水平均上调了,但仅有高剂量组有显著统计学意义（P＜0.05）。（4）尽管低剂量组差异无统计学意义,‘但体现了治疗效果可能与给药剂量呈正相关。结论：肝纤维化大鼠经龙血素B干预后,（1）肝组织a-SMA蛋白表达降低,提示HSC的激活和增殖受到抑制,龙血素B治疗有效；（2）肝组织SOD和GSH-Px的活力升高,MDA含量降低,提示龙血素B能促进肝脏氧自由基清除,改善氧化应激状态,减轻氧化应激损伤；（3）肝组织TNF-a mRNA的表达水平下调和PPAR-a mRNA的表达水平上调,提示龙血素B能削弱参与肝纤维化启动与进展的重要炎症因子TNF-a的产生,阻滞肝纤维化的发生。第三部分：龙血素B对肝纤维化大鼠肝组织PDGF-BB、TGF-β1信号通路的影响目的：通过对肝纤维化大鼠肝组织血小板衍生生长因子-BB（Platelet derived growth factor-BB, PDGF-BB）、转化生长因子-pl（Transforming growth factorbetal-β1, TGF-β1）信号通路变化的研究,探讨龙血素B抗肝纤维化的可能机制。方法：免疫印迹法检测各组大鼠肝组织中smad3、smad7、PDGF-BB蛋白表达的变化；RT-PCR法检测各组大鼠肝组织TGF-β1、Collage I mRNA表达的变化；经分析软件,通过统计学方法比较其变化。结果：与模型组比较,（1）高、低剂量组均可下调smad3、smad7、PDGF-BB蛋白的表达,但是高剂量组smad3、smad7表达水平下降才有统计学差异（P<0.05）,低剂量组则无统计学意义；而且低剂量组PDGF-BB蛋白表达水平下降有统计学差异（P<0.05）,高剂量组PDGF-BB蛋白表达水平显著下降（P<0.01）。（2）高、低剂量组均可下调TGF-β1 mRNA的表达（P<0.05或0.01）；高、低剂量组均下调Collage I mRNA的表达,但仅有高剂量组表达下调有统计学意义（P<0.05）而低剂量组无统计学意义。结论：肝纤维化大鼠经龙血素B干预后,（1） Collage I mRNA的表达水平下调,提示龙血素B可抑制胶原纤维的合成；（2） PDGF-BB蛋白表达水平下降,提示龙血素B可抑制HSC的增殖；（3） TGF-β1 mRNA和smad3表达水平下降,而smad7水平升高,提示龙血素B抑制肝纤维化可能通过TGF-β1/smad信号转导通路实现。