北柴胡种质资源质量评价方法研究

来源 :河南中医学院 河南中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:luwei2431231
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目的:通过对柴胡药材进行系统研究,制定柴胡主要指标性成分柴胡皂苷a、d、挥发油及醇溶性浸出物的含量测定方法,从而更有效地保证柴胡药材的质量;确定河南嵩县柴胡的最适采收期,为柴胡药材的生产和加工提供科学依据;初步建立柴胡药材HPLC及GC指纹图谱;测定主产区柴胡药材中的重金属含量,且对主产区柴胡药效学进行比较研究,从而更全面科学地制定柴胡种质资源质量评价方法。  方法:采用HPLC及UV法分别对14批柴胡药材中指标性成分柴胡皂苷a、d、挥发油含量及醇溶性浸出物进行测定,制定了柴胡指标性成分的定量方法;并采用此定量方法对河南嵩县一年内不同采收期的柴胡中指标性成分动态积累规律进行研究,确定了嵩县柴胡的最适采收期;分别建立27批柴胡样本的HPLC及20批样本的GC指纹图谱,并对其进行聚类分析及相似度分析,建立了柴胡药材的HPLC及GC指纹图谱及其质量评价方法;分别测定了六个主产区柴胡药材中的重金属的含量,并对其解热和抗炎作用进行比较研究,制定出全面科学的质量评价方法。  结果:通过研究确定了柴胡指标性成分的含量测定方法,柴胡皂苷a、d的HPLC色谱条件为:色谱柱:phenomenex-LunaC18(4.6×250mm,5μm);流动相:乙腈-水(50:50);流速:0.8m1·min-1;蒸发光检测器;漂移管温度:93℃;空气流速:2.5L·min-1;柴胡皂苷a、d分别在2.08~14.56μg(r=0.9999)、2.02~14.14μg(r=0.9999)范围内具有良好的线性关系,其平均加样回收率分别为99.92%、102.41%,RSD为2.8%、3.1%;同时采用紫外分光光度法对以上柴胡样本中的挥发油进行含量测定;并测定其醇溶性浸出物的含量。结果表明,所建立的测定方法简便,重复性良好;确立河南嵩县柴胡在十月或十一月采集最适合;分别采集了27批柴胡药材的HPLC及20批柴胡药材的GC色谱图,进行了方法学考察,应用聚类分析方法将样本各分为三类,应用CHROMAP1.5指纹图谱软件对柴胡药材HPLC、GC色图谱进行相似度评价,分别确认了11及34个共有峰,并建立其共有模式,进而初步建立柴胡药材HPLC及GC指纹图谱及其质量评价方法;以适合药材检测及GAP认可的《药用植物及制剂进出口绿色行业标准》为限量标准,检测河南、河北、陕西、山西、辽宁及内蒙六个主产区所产药材中重金属(铜、汞、铅、镉)、砷盐均符合标准;通过对以上六个主产区柴胡的解热抗炎作用进行比较研究,结果表明,六个产区柴胡均具有较好的解热抗炎作用,其中河南柴胡具有极显著性差异。  结论:通过对柴胡药材的系统研究,建立了柴胡药材多指标性成分质控方法;确定了河南嵩县柴胡的最适采收期,为药材的生产提供了科学依据;初步建立了柴胡药材的HPLC及GC指纹图谱及其质量评价方法;且对六个主产区的柴胡药材进行了重金属检测及药效学研究,使建立的柴胡质量评价方法更加全面科学,从而更好地反映柴胡种质资源的内在质量。
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