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目的: 子宫内膜异位症(endometriosis,EMS,内异症),被喻为21世纪困扰妇女的疑难病。其主要病理特征是异位内膜的周期性出血和其周围组织纤维化,致病变区形成紫褐色斑点或小泡,甚至形成实质性结节或包块。本研究从动物实验方面探讨化瘀散结中药(妇痛宁)对内异症模型异位内膜组织单核细胞趋化因子(MCP-1)、细胞内粘附分子(ICAM-1)、纤维连接蛋白(FN)、转化生长因子(TGF β1)及其mRNA表达的影响,旨在从免疫学及分子生物学角度进一步探讨妇痛宁对EMS异位内膜种植、粘附、增生及纤维化的影响。 方法: 建立子宫内膜异位症动物模型,给予妇痛宁治疗,同时设桂枝茯苓丸为对照组,利用免疫组化、逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR),检测MCP-1、ICAM-1、FN、TGF β1在EMS大鼠异位内膜组织中的分布、相对含量及mRNA的表达。印证MCP-1、ICAM-1、FN、TGF β1在EMS形成过程中的作用。观察妇痛宁对EMS大鼠异位内膜组织中MCP-1、ICAM-1、FN、TGF β1及其mRNA表达的影响。 结果: 1.免疫组化研究发现: 1.1 MCP-1主要分布于EMS大鼠异位内膜的间质细胞,在腺细胞也有大量分泌。正常组几乎无MCP-1的基础表达。与正常组相比,模型组MCP-1的染色范围显著增强,染色较深。妇痛宁组、桂枝茯苓丸组MCP-1的染色范围较模型组变小,呈散在分布,染色变淡,妇痛宁组优于桂枝茯苓丸组;两治疗组较模型组、两治疗组之间阳性细胞相对含量也有明显差异(p<0.01、p<0.05)。 1.2 ICAM-1主要分布于EMS大鼠异位内膜的间质细胞中。正常组有ICAM-1的弱表达。但模型组较正常组ICAM-1的染色范围明显增强,腺上皮染色也增强。妇痛宁组、桂枝茯苓丸组ICAM-1的染色范围较模型组明显减少,染色程度明显减弱,妇痛宁组优于桂枝茯苓丸组。两治疗组较模型组、两治疗 中戈货孽要组之间阳性细胞相对含量也有明显差异(P<o,01、p<0.05)。 1.3 TGFp,在腺上皮与基底细胞中分布较多,间质细胞也有分布。正常组子宫内膜组织中有弱的TGFp,的表达,与正常组相比,模型组的TGFp,分布范围增强,染色加深。妇痛宁组TGFp、的分布范围较模型组明显减少,染色变淡,桂枝获荃丸组TGF pl的分布范围较模型组减少,呈散在分布,腺上皮无染色。但妇痛宁组优于桂枝获荃丸组。两治疗组较模型组、两治疗组之间阳性细胞相对含量也有明显差异(p<0.01、p<0 .05)。 1.4州主要分布于EMS异位内膜的基底膜及间质细胞中,正常组子宫内膜组织中有FN的基础表达,分布均匀。模型组较空白组的FN染色范围增大,染色增深。腺上皮有轻度染色。妇痛宁组较模型组的FN染色变淡,范围明显减少,腺上皮、腺细胞无染色。桂枝获菩丸组亦较模型组的FN染色范围减少,但不如妇痛宁组。两治疗组较模型组、两治疗组之间阳性细胞相对含量也有明显差异(p<0.01、p<0.05)。 2.RT一PCR研究结果 RT一PCR结果进一步证实了在EMS大鼠模型的异位内膜组织中有MCP一1、ICAM一1、FN、TGFp,及其mRNA的异常表达,即较正常组内膜组织中含量增高;同时显示妇痛宁能降调EMS异位内膜组织中MCP一1、ICAM一1、FN、TGFpl及其n1RNA的表达水平。结论: 本实验研究印证了细胞因子MCP一l、ICAM一1、FN、TGFp,参与了异位内膜种植、免疫粘附、增殖及纤维化的整个过程。化癖散结中药妇痛宁为治疗EMS的代表方剂,通过降调异位内膜组织中MCP一l、ICAM一l、FN、TGF pl及其mRNA的表达水平,显示其多靶点的免疫预防及治疗作用,体现了化疲散结中药妇痛宁对EMS的非线性的整体调节作用。