4-氟苯胺的微生物降解及C-F键活化的研究

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4-氟苯胺(4-Fluoroaniline,4-FA)是常见的含氟芳香精细化工中间体,被广泛应用于含氟农药、医药和染料的工业合成当中。随氟化工的迅速发展、含氟农药的普及使用,大量的含氟芳香化合物被引入到自然环境当中。含氟芳香化合物随生物链的延伸,不断在生物体内累积,进而影响人类的健康。如何治理含氟芳香化合物污染便成为了亟待解决的问题。与化学方法、物理方法相比,生物方法有高效率、低成本、操作简单和环境友好无二次污染等优势,更加吸引人们的目光和关注。因此,本论文以4-氟苯胺作为底物进行微生物降解的研究。主要研究结果如下:①以4-氟苯胺作为降解底物,从江苏盐城工业园区污染的土样中筛选得到了高效降解菌株F-1。经过对基因组的提取、PCR扩增、16S rDNA检测、电子透射显微镜测试等,证实菌株F-1属于蜡样芽孢杆菌,外观形态为杆状,尺寸约为3μm,因此将该菌株命名为Bacillus Cereus Strain F-1。②通过正交试验,得到Bacillus Cereus Strain F-1生长的最佳条件,转速=180rpm、T=30℃、pH=7.0、接种量=5%。又通过控制变量法研究了不同碳源、氮源、葡萄糖浓度对Bacillus Cereus Strain F-1生长的影响,发现:碳源为酵母抽提物,氮源为L-赖氨酸,葡萄糖浓度为0.6g/L时,菌株的生长状况最佳。③利用离子色谱对降解体系中的氟负离子进行定性和定量的检测,证实:在Bacillus Cereus Strain F-1的作用下4-氟苯胺的C-F键发生了断裂。改变不同的条件,对降解条件进行优化,得到最佳降解条件:t培养=3d、C葡萄糖=0.6g/L、pH=7.0、葡萄糖作为共代谢基质。④从降解体系中萃取得到降解产物的混合物,再经过薄层色谱(EA:PE=1:1)分离纯化得到两种代谢产物。经1H/19F/13C-NMR、MS分析,得两种代谢产物分别为N-乙酰基-4-氟苯胺和N-丙酰基-4-氟苯胺。并推出4-氟苯胺在BacillusCereus Strain F-1作用下的降解机理。
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