siRNA沉默HIF-1α对缺氧培养的人脉络膜黑色素瘤细胞HO-1表达的影响

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目的:研究缺氧状态下siRNA沉默HIF-1α对人眼脉络膜黑色素瘤细胞HO-1表达的影响。方法:利用氯化钴诱导人眼脉络膜黑色素瘤细胞株的缺氧模型,设为缺氧组;无干预因素为长氧组,缺氧状态下采用RNA干扰技术使HIF-1α基因沉默,设为转染组,转染空脂质体后缺氧培养为对照组;用PCR及Western blot技术测定各组HIF-1α和HO-1的mRNA及蛋白质含量。结果:缺氧组HIF-1α的rnRNA表达为0.907±0.032,常氧组为0.878±0.034,两者比较差异无统计学意义;缺氧组HIF-1α的蛋白的表达为0.236±0.014,常氧组为0.813±0.047,低氧组较常氧组明显降低(p<0.05),差异有统计学意义;缺氧组HO-1的mRNA及蛋白表达水平分别为0.935±0.032、0.791±0.030较常氧组0.652±0.053、0.316±0.013明显降低,差异具有统计学意义(p<0.05);转染组HIF-1α的mRNA及蛋白的表达水平为0.230±0.044、0.213±0.026,对照组为0.978±0.030、0.817±0.049较转染组显著降低,差异具有统计学意义(p<0.05);转染组HO-1的mRNA及蛋白的表达水平为0.497±0.033、0.249±0.028,对照组为0.806±0.040、0.833±0.052较转染组显著降低(p<0.05),差异具有统计学意义。结论:缺氧使人眼脉络膜黑色素瘤细胞HIF-1α蛋白及HO-1mRNA及蛋白质含量表达升高;合成的siRNA通过转染可明显下调HIF-1α及HO-1的表达。
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