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目的:探究循环纤维细胞在慢性血栓栓塞性肺动脉高压（Chronic thromboembolic pulmonary hypertension,CTEPH）肺动脉内膜纤维化中的作用。方法:收集CTEPH病人及对照组的肺动脉组织标本。肺动脉组织HE染色后观察其病理特征,利用天狼星红染色检测肺动脉组织中胶原纤维的含量,检测胶原蛋白Ⅰ（CollagenⅠ,ColⅠ）、弹力蛋白（Elastin）和α-平滑肌肌动蛋白（Alpha-smooth muscle actin,α-SMA）的表达水平,确定内膜纤维化的程度;以CD45和ColⅠ免疫荧光抗体双染检测肺动脉组织中循环纤维细胞（Fibrocyte,FC）的数量和分布;以免疫组化检测肺动脉组织中FC转化相关因子的表达水平。同时,将串联质谱标签技术（Tandem Mass Tag,TMT）、高效液相色谱分级技术以及基于质谱的定量蛋白质组学技术有机结合,对人肺动脉组织样本进行定量蛋白组的研究。取60只健康清洁级Sprague Dawley大鼠,随机分为三组:假手术组（n=20）、亚硝基左旋精氨酸甲酯（NG-Nitro-L-arginine Methyl Ester,Hydrochloride,L-NAME）组（n=20）和CTEPH组（n=20）。CTEPH组大鼠在注栓前一周每日腹腔注射50mg/kg·d L-NAME,直至测压并取肺动脉组织当天,在给药第八天将大鼠自体血栓经左颈外静脉注入5个混悬在2m L氨甲环酸溶液中的长3mm,直径1.3mm的圆柱体自体血凝块,4、7天后重复等量注射,以建立CTEPH动物模型。以等量生理盐水替代自体血凝块注入假手术组颈外静脉。L-NAME组除以生理盐水替代血栓注入颈外静脉以外,同CTEPH组每日腹腔注射50mg/kg·d L-NAME。在第一次注栓后的第21天,测量各组大鼠平均肺动脉压力（Mean pulmonary arterial pressure,mPAP）,取出大鼠肺动脉,观察大鼠肺动脉内膜重塑情况,并检测肺动脉内膜中FC的数量。结果:天狼星红染色和纤维化相关指标免疫组化染色显示,CTEPH患者肺动脉内膜存在明显的胶原纤维堆积,ColⅠ、α-SMA和Elastin染色呈强阳性反应,纤维化明显。蛋白组学研究显示人CTEPH肺动脉内膜中胶原蛋白肽链表达较对照组肺动脉明显升高,Collagen alpha-1（XII）chain的表达水平CTEPH/Control达1.487（P<0.05）,Collagen alpha-1（V）chain的表达水平CTEPH/Control达1.506（P<0.05）,弹力蛋白表达水平CTEPH/Control为0.356（P<0.05）。蛋白组学结果还表明单核细胞向FC分化的抑制因子血清淀粉样蛋白P（Serum amyloid P,SAP）表达水平明显降低,CTEPH/Control为0.589（P<0.05）,而转化生长因子-β诱导的蛋白ig-h3（Transforming growth factor-beta-induced protein ig-h3,TGFB1）明显升高,CTEPH/Control为1.371（P<0.05）。利用免疫荧光双染实验,在CTEPH肺动脉内膜中检测到FC。免疫组化实验发现CTEPH肺动脉内膜中白细胞介素-13（Interleukin-13,IL-13）表达较对照组明显升高,而白细胞介素-4（Interleukin-4,IL-4）仅微量表达。转化生长因子-β1（Transforming growth factor-beta 1,TGF-β1）则虽有表达但较对照组并未明显升高,而抑制因子SAP表达较对照组也未降低。在动物实验中,本研究建立的CTEPH大鼠模型成功地模拟了CTEPH患者肺动脉压力升高和肺动脉内膜纤维化的表现:CTEPH大鼠mPAP达22.01±1.904mm Hg,明显高于假手术组（11.36±1.294 mm Hg）和L-NAME组（16.30±1.337mm Hg）,（P<0.05）;肺动脉组织切片苏木精—伊红（Hematoxylin-eosin,HE）染色表明,CTEPH大鼠肺动脉内膜较对照组和L-NAME组明显增厚且与中膜界限明显;天狼星红染色内膜呈明显阳性反应,表明肺动脉内膜明显纤维化;免疫组化染色结果显示,CTEPH大鼠肺动脉内膜内α-SMA和Elastin呈明显阳性反应;利用免疫荧光双染实验证实,增厚的肺动脉内膜中也存在FC。结论:CTEPH患者肺动脉内膜中MFC和胶原纤维等大量细胞外基质堆积,纤维化明显。CTEPH患者增厚的肺动脉内膜中可检测到较多的FC,提示FC在CTEPH肺动脉纤维化过程中发挥重要作用,而IL-13可能是FC分化的主要因素。本研究建立的CTEPH大鼠模型成功模拟了人CTEPH肺动脉重塑的病理和病理生理特征,mPAP明显上升,肺动脉内膜呈现明显的增厚和纤维化,并检测到FC。本研究初步提示FC在CTEPH肺动脉纤维化过程中发挥重要作用,并成功建立了新型的CTEPH大鼠模型,为后续CTEPH肺动脉内膜纤维化机制和干预研究的开展提供了可行的模型。