【摘 要】
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本实验旨在探讨不同浓度的共轭亚油酸(CLA)对体外培养的骨骼肌纤维类型分布和转化的影响。CLA是一种作用显著的营养因子,生理功能非常广泛,包括促进生长、改善胴体品质和肉质、
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本实验旨在探讨不同浓度的共轭亚油酸(CLA)对体外培养的骨骼肌纤维类型分布和转化的影响。CLA是一种作用显著的营养因子,生理功能非常广泛,包括促进生长、改善胴体品质和肉质、抗癌、抗动脉粥样硬化、增加免疫抗病力等,其中对胴体品质和肉质的影响是目前国内外研究的热点之一。肌细胞根据所含的酶系及其活性特点,分为四种:慢速氧化型肌纤维(Ⅰ型)、快速氧化型(2a型)、快速酵解型(2b型)和中间型肌纤维(2x型)。
实验选择刚出生的仔猪,取腿部肌肉分离、纯化骨骼肌卫星细胞进行原代培养,在卫星细胞向肌细胞转化过程中,添加CLA浓度分别为0、50、100、150、200μg/mL的DMEM/F12分化培养基培养。在处理后4、8和12 d,每个处理分别取出3瓶细胞用以提取总RNA进行反转录,采用Tannbe建立的多重PCR的方法测定细胞中Ⅰ、2a、2b和2x4种MyHC的基因表达,阐述CLA对肌纤维类型分布与转化的影响,为深入揭示CLA改善肉质的分子细胞学机制提供新的科学依据。
研究结果如下:
(1)骨骼肌卫星细胞快速增值后开始融合,一旦细胞核融合在一个细胞中,便无法分散细胞。本实验证明,在高浓度血清条件下,细胞可传至三代。
(2)肌纤维类型的分布随培养时间的延长发生显著变化。在D8,除MyHC2x型肌纤维未发生显著变化外,MyHCⅠ和2a型肌纤维显著下降,而MyHC2b型肌纤维显著增加。在D12,MyHC2b型肌纤维显著增加,而其余3种类型肌纤维均显著下降。
(3)添加CLA可改变肌纤维类型的组成,且该作用与添加水平和处理时间密切相关。添加50μg/mL CLA对D4~12的肌纤维类型没有显著影响,100μg/mLCLA主要影响D12的,而150~200μg/mL CLA则可显著影响D4~12的。
(4) CLA对肌纤维类型组成的影响主要表现为提高MyHCⅠ和2a型肌纤维比例,而降低MyHC2b和2x型肌纤维比例,这在一定程度上解释CLA提高猪肉品质的原因。
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