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第一部分C3H10T1/2干细胞的培养、诱导,293细胞的培养,AdBMP5、AdBMP9重组腺病毒的扩增目的:利用细胞诱导技术完成AdBMP5、AdBMP9重组腺病毒质粒对C3H10T1/2干细胞的诱导,并通过293细胞对AdBMP5、AdBMP9重组腺病毒质粒进行扩增,为进一步阐明在BMP5、BMP9在C3H10T1/2干细胞向心肌细胞分化过程中的影响奠定基础。方法:以293细胞为工具细胞,对AdBMP5、AdBMP9重组腺病毒质粒进行扩增;以浓度为2.67 ml/LAdBMP9重组腺病毒感染C3H10T1/2干细胞,并浓度为3.75ml/LAdBMP5重组腺病毒感染C3H10T1/2干细胞。结果:AdBMP5、AdBMP9重组腺病毒可被293细胞成功扩增;AdBMP5、AdBMP9重组腺病毒感染C3H10T1/2干细胞的感染效率分别为36%和34%。结论:通过293细胞对AdBMP5、AdBMP9重组腺病毒扩增,病毒滴度被提高;AdBMP5、AdBMP9重组腺病毒可成功感染C3H10T1/2干细胞。第二部分BMP5和BMP9对C3H10T1/2干细胞向心肌样细胞分化的影响目的:研究骨形态形成蛋白5（bone morphogenetic proteins 5,BMP5）和BMP9在C3H10T1/2干细胞向心肌细胞分化过程中的影响。方法:以浓度为3.75ml/L的AdBMP5重组腺病毒质粒感染C3H10T1/2干细胞,并以浓度为2.67 ml/L的AdBMP9重组腺病毒质粒感染C3H10T1/2干细胞,诱导后1周和2周应用RT-PCR方法及激光共聚焦方法分别检测C3H10T1/2干细胞中心肌特异转录因子及特异性蛋白的表达变化。2周后应用电子显微镜观察细胞超微结构的改变。结果:C3H10T1/2干细胞经AdBMP5、AdBMP9重组腺病毒诱导1、2周后,细胞体积明显变大,排布走向趋于一致,细胞间连接紧密,折光性增强。细胞中开始出现心肌特异性转录因子NKx 2.5、GATA-4、MEF2C及心肌特异性表达蛋白连接蛋白43（connexin43,Cx43）和心肌特异性肌钙蛋白T（cardiac isoform of Tropnin T, cTnT）的表达;2周后出现心肌特异性超微结构肌丝和闰盘。结论:BMP5、BMP 9很可能影响体外培养的C3H10T1/2干细胞定向分化为心肌样细胞。