【摘 要】
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目的:建立大鼠颈椎间盘纤维环细胞培养体系和诱导纤维环细胞凋亡模型,研究纤维环细胞凋亡机理,进一步研究益气化瘀方及拆方对大鼠颈椎间盘纤维环细胞增殖、分化以及凋亡的调
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目的:建立大鼠颈椎间盘纤维环细胞培养体系和诱导纤维环细胞凋亡模型,研究纤维环细胞凋亡机理,进一步研究益气化瘀方及拆方对大鼠颈椎间盘纤维环细胞增殖、分化以及凋亡的调控作用,探讨益气化瘀类中药治疗颈椎病的机理,丰富和发展中医气血理论.方法:使用酶消化法,建立大鼠颈椎间盘纤维环细胞培养体系;通过抗Fas抗体诱导,建立纤维环细胞凋亡模型;采用MTT法,筛选出益气化瘀方、益气方和化瘀方作用纤维环细胞的最佳含药血清;运用组织病理学、免疫组织化学、分子生物学、生物信息学以及医学图象分析等技术方法,系统研究椎间盘纤维环细胞中细胞凋亡率和凋亡相关因子Bcl-2、Bax、Caspase8改变、FAK和Integrinβ1基因表达以及正常与凋亡纤维环细胞基因表达谱的改变;系统观察益气化瘀方、益气方和化瘀方含药血清以及IGF-I对照组干预凋亡纤维环细胞的过程.结论:建立了椎间盘纤维环细胞的培养体系和椎间盘纤维环细胞凋亡模型.证实椎间盘纤维环细胞凋亡过程涉及到凋亡相关因子的改变、粘附功能的减退以及由此导致的细胞信号转导通路和串话过程的变化.益气化瘀方及其拆方对椎间盘纤维环细胞调节作用涉及多个靶点,多层次、多侧面的网状调控作用,表现为延缓细胞凋亡,增加integrinβ1和FAK的基因表达,发挥正向调控细胞内外信号转导过程.
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