【摘 要】
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将耐酸、抗热的微生物植酸酶基因(phytase gene)转入禾谷类作物中,可望使禾谷类作物中的磷素及含有该作物的配合饲料中的其它原料的磷素从植酸中释放出来,从而可大大提高其磷
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将耐酸、抗热的微生物植酸酶基因(phytase gene)转入禾谷类作物中,可望使禾谷类作物中的磷素及含有该作物的配合饲料中的其它原料的磷素从植酸中释放出来,从而可大大提高其磷素的利用率,同时还能降低动物植酸排泄所造成的环境污染.在植物遗传转化过程中,标记基因用于识别和鉴定转基因植物.但其对植物的生长并非必要.而且它的存在还会引起安全性、妨碍多次重复转化及不利于多种优良性状的组合等问题.该研究采用剔除标记基因的共转化系统,构建了无选择标记基因的植酸酶基因植物表达载体p1300UbiPHYTASE,该表达载体选用植物高效遗传转化载体:pCAMBIA载体系列中的Pcambia1300,剔除了Pcambia1300载体上T-DNA区内的选择标记基因hpt和花椰菜花叶病毒35S启动子,使T-DNA区仅含有目的基因phytase(目的基因为原长基因,含有能增强基因表达的信号肽和内含子序列).选用单子叶植物高效表达启动子玉米Ubiquitin启动子,经酶切、PCR鉴定表明:该载体构建正确,适合于禾谷类作物的遗传转化.利用冻融法将表达载体p1300UbiPHYTASE导入农杆菌EHA105中,拟采用双农杆菌(two-plasmid/two-strain)介导法对植物细胞进行共转化,以期获得无选择标记的转植酸酶基因植株.
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