【摘 要】
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细胞微环境在维持细胞正常生理进程中起着非常关键的作用。得益于生物荧光成像技术的发展,肉眼不可见的细胞微环境的生理进程通过荧光染色实现了可视化观察。极大地促进了相关生物生理和疾病的研究。本文围绕细胞微环境检测用荧光探针展开。设计了两类新型的荧光探针用于细胞内亚硝酰氢(HNO)检测和细胞器定位荧光成像研究。此外,以荧光碳点为材料设计合成了用于内质网靶向的碳点荧光探针,探究其对内质网的靶向作用。(1)设
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细胞微环境在维持细胞正常生理进程中起着非常关键的作用。得益于生物荧光成像技术的发展,肉眼不可见的细胞微环境的生理进程通过荧光染色实现了可视化观察。极大地促进了相关生物生理和疾病的研究。本文围绕细胞微环境检测用荧光探针展开。设计了两类新型的荧光探针用于细胞内亚硝酰氢(HNO)检测和细胞器定位荧光成像研究。此外,以荧光碳点为材料设计合成了用于内质网靶向的碳点荧光探针,探究其对内质网的靶向作用。(1)设计合成新型双异佛尔酮荧光染料母体,以三苯基膦为识别基团,设计、制备了用于检测HNO的荧光探针CHT-P,通过比值信号实现对于HNO进行定性、定量检测以及活细胞成像。当探针与检测物HNO结合时,三苯基膦作基团所在对位的荧光信号会被淬灭,而邻位的荧光信号被保留下来,进而达到比值检测HNO的效果,同时在Hela细胞成像中也表现出良好的比值效果。探针表现出高选择性,高灵敏度以及良好的光稳定性。(2)设计合成新型的基于荧光碳点的探针(CDs-PEI-HN),用于高选择性的内质网荧光成像。通过内质网定位基团五氟苯甲酸对荧光碳点进行表面修饰和改进得到目标探针CDs-PEI-HN。通过各种表征以及光谱测试验证了探针的成功制备以及光谱性质。光谱测试证实该探针具有良好的水溶性以及较高的光稳定性等优点。细胞实验证实该荧光碳点具有较好的内质网定位效果。可进一步用于内质网荧光成像。由于其高的光稳定性,有望发展成一个用于活细胞内质网长时间动态跟踪的荧光探针。
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