【摘 要】
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SC7A1是天蓝色链霉菌A3(2)的一个文库质粒,将它导入天蓝色链霉菌A3(2)的M145或J1501菌株后,引起宿主产素产孢发生延迟,因此推测SC7A1中存在负调控基因,定位并研究该基因的生
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SC7A1是天蓝色链霉菌A3(2)的一个文库质粒,将它导入天蓝色链霉菌A3(2)的M145或J1501菌株后,引起宿主产素产孢发生延迟,因此推测SC7A1中存在负调控基因,定位并研究该基因的生物学功能是该研究的目的.为定位该基因,构建了SC7A1的一系列亚克隆,通过将这些亚克隆分别转化M145并观察表型,将目的基因从33kb EcoRI片段,到18kb的Bg/II片段,最后定位在第26个ORF：SC7A1.26上.接着构建了SC7A1.26的基因中断质粒pHZ2718,将pHZ2718导入M145后得到两个SC7A1.26基因中断菌株YX1和YX2,并用Southern杂交验证.对YX1和YX2进行抗生素合成的检测,发现放线紫红素、钙依赖抗生素和次甲基霉素都提前产生并且超量表达;经过孢子记数发现YX1和YX2的产孢要好于野生形菌株M145,孢子数是M145的两倍多.该研究将SC7A1.26命名为nrsB.经过数据库检索发现,天蓝色链霉菌A3（2）的基因组中还有9个nrsB同源基因,氨基酸序列的比较发现nrsB的C端可能存在一个保守的蛋白磷酸激酶C（PKC）的识别位点SXP,该研究对该位点的S（丝氨酸）进行了定点诱变,通过互补实验证明该丝氨酸位点是NrsB实现其功能的一个重要位点.突变则可以使NrsB丧失功能.
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