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Aβ级联学说是目前比较公认的阿尔兹海默病(AD)发病机制假说之一。该学说认为AD发病的关键点在于脑内Aβ水平的增高。脑内Aβ主要通过血脑屏障清除、酶蛋白降解、脑实质细胞降解等方式清除。低密度脂蛋白受体相关蛋白-1(LRP1)是Aβ血脑屏障清除途径中Aβ的关键转运受体。LRP1是多种蛋白的膜受体,可直接与Aβ结合,也可与载脂蛋白E (apoE)/A β及α2巨球蛋白(α2M)/Aβ等复合物结合,从而实现脑内Aβ经血脑屏障的外流转运。LRP1水平下降会导致Aβ在脑内的堆积,加速AD的病理发生过程。APP/PS1双转基因鼠是AD的常用模型之一,该小鼠5月龄出现老年斑(SP),并随年龄增长脑组织出现LRP1mRNA的减少。AD的病性为本虚标实。肾虚偏衰、邪毒阻络是导致神明失用的内在机制。Aβ脑内清除障碍会导致脑微血管壁Aβ形成、脑内Aβ低聚物大量聚集,导致认知功能障碍,这类似中医所说的“邪毒阻络、神机失用”。“醒神、益肾、祛毒、通络”可能是治疗老年痴呆的中医机理,该机理能为针刺实验研究提供依据。针刺可能通过影响LRP1的表达,促进Aβ清除出脑,改善学习记忆力。为此,本研究以针刺“百会”、“涌泉”穴有“醒神、益肾、祛毒、通络”作用为中医机理,以APP/PS1双转基因小鼠为AD动物模型,观察针刺对其学习记忆行为学改变及脑内Aβ水平的影响,对Aβ血脑屏障清除途径主要转运蛋白LRP1及其mRNA相对表达量的影响,以探求针刺干预AD的作用机制,证明针刺可通过调控LRP1基因表达,提高LRP1水平,促进Aβ转运、清除出脑。实验目的采用“百会”、“涌泉”配穴干预APP/PS1双转基因鼠,探索电针对脑Aβ水平及血脑屏障Aβ转运途径的关键受体LRP1及其mRNA的可能影响。实验方法本实验以4月龄APP/PS1双转基因鼠为AD动物模型,将24只APP/PS1双转基因鼠随机分为模型组(M)和电针治疗组(EA),每组12只；以12只同月龄同窝转基因阴性鼠为正常对照组(C)。电针治疗组针刺“百会”,电针正、负电极分别接左、右侧“涌泉”穴,采用疏密波,频率为1/50Hz,强度0.5mA。每次针刺持续15min,隔日1次,针刺6周。模型组、正常对照组除不针刺外,其它处理与电针治疗组相同。干预治疗后,以Morris水迷宫观察APP/PS1转基因鼠学习记忆行为学变化,以空间学习记忆行为学相关指标显示电针干预AD的治疗效果。酶联免疫吸附(ELISA)定量检测海马A β1-42、Aβ1-40水平,蛋白质免疫印记(WB)、实时荧光定量PCR(rt-PCR)分别检测海马LRP1蛋白水平、LRP1mRNA水平,以观察电针对Aβ血脑屏障清除途径转运蛋白LRP1及其r(?)RNA的影响,为说明电针干预AD的疗效及机制,提供实验依据。实验结果1.Morris水迷宫行为学测试结果示：各组逃避潜伏时、经过平台次数、平台象限时长差异没有统计学意义(P>0.05)；2.ELISA法检测结果示：模型组海马A β 1-42、A β 1-40表达水平及Aβ1-42/Aβ1-40比值均显著高于正常对照组(P<0.01)；电针治疗组海马A β1-42、A β1-40表达水平、A β 1-42/A β 1-40比值均显著低于模型组(P<0.01)；3.蛋白免疫印迹检测结果示：模型组海马LRP1蛋白相对表达量低于正常对照组(P<0.05)；与模型组比较,电针治疗组海马LRP1相对表达量差异无统计学意义(P>0.05)；4.实时荧光定量PCR检测结果示：模型组海马LRP1mRNA相对表达量低于正常对照组(P<0.05)；与模型组比较,电针治疗组海马LRP1、LRP1mRN A相对表达量差异无统计学意义(P>0.05)。结论电针未能提高5月龄APP/PS1双转基因小鼠海马LRP1基因的翻译与LRP1蛋白表达,但能显著降低海马内Aβ水平。电针降低AD脑内Aβ的机制,仍需要进一步探讨。