目的:　　 研究Toll样受体9(Toll-likereceptor9,TLR9)在胰腺星状细胞(pancreaticstellatecells,PSCs)中的表达情况,并了解TLR9激动剂在胰腺星状细胞及其介导的胰腺癌化疗耐药中的作用。　　 方法:　　 在原有大鼠胰腺星状细胞分离培养技术基础上改进,将胰腺组织块碎片进行分离培养并传代,从而得到纯化的星状细胞。采用油红O染色,结合免疫荧光以及蛋白免疫印迹检测技术来鉴定小鼠胰腺星状细胞;通过细胞计数及台盼蓝染色观察细胞生长及活力。采用免疫组化及蛋白免疫印迹方法检测小鼠胰腺星状细胞TLR9的表达;应用MTT法检测TLR9激动剂对星状细胞的增殖的影响。随后将胰腺星状细胞与胰腺癌MIAPaCa-2细胞进行Transwell共培养,分为对照组,共培养组,共培养+OND1826组,48小时后采用ELISA法检测上清液中的一氧化氮(NO)及白介素-β(IL-1β)表达量,加入10μg/ml吉西他滨继续培养24小时,采用后MTT法检测肿瘤细胞凋亡情况。　　 结果:　　 组织块法所得小鼠原代胰腺星状细胞油红染色阳性;第3天起细胞快速生长并逐渐活化,传代后的细胞基本活化。活化的PSCs免疫荧光染色显示α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达阳性。蛋白免疫印迹检测示:活化的PSCs均有表达α-SMA、结蛋白(desmin),完全活化后desmin表达明显增多(P＜0.05)。免疫组化及蛋白免疫印迹结果显示PSC表达TLR9,予以TLR9激动剂OND1826后可抑制胰腺星状细胞生长(P＜0.05)。与对照组相比,共培养组的NO、IL-1β表达量明显增加,肿瘤细胞凋亡明显较少(P＜0.05);OND1826干预后NO、IL-1β表达量有所减少,而肿瘤细胞凋亡有所增加(P＜0.05)。　　 结论:　　 我们所建立的新的小鼠星状细胞分离培养方法——组织块法可成功分离出小鼠胰腺星状细胞。TLR9在胰腺星状细胞中有表达。通过激活胰腺星状细胞TLR9,可抑制胰腺星状细胞的增殖能力以及胰腺星状细胞介导胰腺癌耐药。这一结果提示,TLR9在胰腺星状细胞的增殖活化中有重要作用,进一步研究TLR9及其通路在胰腺星状细胞的增殖及胰腺癌耐药中的机制,有望为控制胰腺癌耐药提供新的治疗靶点。