β—甘露聚糖酶在番木瓜果实成熟软化中的作用及酶学性质初探

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  β-甘露聚糖酶是一种日益受到人们关注的半纤维素水解酶,据报道在果实的成熟软化中起了一定作用。本论文主要研究了β-甘露聚糖酶在番木瓜果实成熟软化及发育中的作用以及对番木瓜果实β-甘露聚糖酶进行分离纯化并初步探讨了部分酶学性质。   本实验供试材料为番木瓜果实,采用凝胶扩散及刚果红染色法测定番木瓜果实β-甘露聚糖酶的酶活力,采用组织印迹法对该酶进行组织定位,采用超薄等电聚焦电泳及活性染色法测定同工酶,采用1000mg/L乙烯利溶液、100mmol/L氯化钴溶液处理番木瓜以调控乙烯释放并测定该酶活力及乙烯释放量,以确定乙烯与该酶的关系,同时探讨了不同提取条件以及取样部位对酶活测定结果的影响,以探究β-甘露聚糖酶在番木瓜果实成熟软化及发育中的作用。本实验还从番木瓜果实中提取该酶粗酶液,经过硫酸铵分级沉淀、透析、SephadexG-75凝胶过滤、DEAE-52离子交换层析等方法进行分离纯化后得到基本达电泳纯的β-甘露聚糖酶酶液,用该酶液进行各项酶活性质的研究,初步探讨了番木瓜β-甘露聚糖酶的部分酶学性质。
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