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目的:肺癌已成为国际上最致命的恶性肿瘤之一。其中肺鳞癌占到肺癌总数的25%,并且90%都是男性患者。在肺鳞癌血浆中,微小RNA(miRNA,microRNA)的差异表达谱具有作为诊断生物标志物的潜力。本研究通过对男性肺鳞癌患者的血浆miRNA表达进行四阶段系统性分析,以确定血浆miRNA作为潜在的生物分子标志物,应用于肺鳞癌诊断。方法:在最初的筛选阶段,在3组男性肺鳞癌pool样本和1组正常人pool样本中,通过Exiqon miRNA qPCR panel,我们获得一组在肺鳞癌患者和正常对照血浆pool样本中差异表达的miRNA panel。随之,运用实时定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)技术,通过训练集(32例男性肺鳞癌患者VS.31例正常对照)、测试集(55例男性肺鳞癌患者VS.55例正常对照)的筛选,以及验证集(15例男性肺鳞癌患者VS.15例正常对照)的进一步验证,筛选出具有诊断价值的潜在miRNA。为了深入探究这些miRNA在男性肺鳞癌患者组织和血浆外泌体中的差异表达,我们在23对组织样本和16对血浆外泌体中评估了这些miRNA的表达水平。结果:多阶段独立验证之后,我们最终确定了一组由4个miRNA形成的能有效地区分男性肺鳞癌患者人群和正常人群的分子标签:miR-181a-5p,miR-21-5p,miR-106a-5p和miR-93-5p。通过受试者工作特征曲线(ROC)分析,在训练集、测试集以及额外验证集阶段,这4个miRNA形成的分子标签所对应的曲线下面积(AUC)分别为0.795,0.827和0.914。同时,在男性肺鳞癌患者的组织中,miR-21-5p,miR-106a-5p和miR-93-5p均发现显著上调,miR-181a-5p却发现在组织低表达且有意义。然而在血浆外泌体中,相比于正常对照人群,除miR-93-5p表达具有边缘性意义之外,miR-181a-5p,miR-21-5p和miR-106a-5p都未发现表达有差异。结论:本课题组发现一组由4个miRNA形成的能有效地区分男性肺鳞癌患者人群和正常人群的分子标签(miR-181a-5p,miR-21-5p,miR-106a-5p和miR-93-5p),具有作为潜在辅助诊断肺鳞癌的价值。我们的发现将来有可能应用于临床初筛肺鳞癌,从而改善肺鳞癌患者预后。然而在能够利用这一有力工具之前,关于这些miRNA参与肺鳞癌发生发展的具体机制还需进一步探索。