尿脱落细胞检查、核基质蛋白22、细胞角蛋白20在膀胱移行细胞癌诊断中的研究

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目的:膀胱移行细胞癌的发病率逐年上升,并已成为五种最为常见的肿瘤之一.是泌尿系统最常见的肿瘤.当前膀胱移行细胞癌的诊断主要依靠尿脱落细胞学和膀胱镜下活检标本的病理检查.近年来随着实验技术和理论的进步,相继发现了许多膀胱移行细胞癌的肿瘤标志物,如BTA、野生型P53、端粒酶活性、细胞角蛋白20以及核基质蛋白(NMP)22等.其中以细胞角蛋白20和核基质蛋白22(NMP22)尤受瞩目.我们收集了30例诊断明确的膀胱移行细胞癌患者和25例对照组样本的尿标本,进行尿脱落细胞学、CK20和NMP22的检测,以探讨三者对膀胱移行细胞癌筛检的临床意义.方法:①运用尿脱落细胞涂片,常规HE染色,寻找瘤细胞;②从尿脱落细胞中提取mRNA,利用CK20特异性内、外引物各一对,采用高敏感性和特异性的RT-PCR法,对提取的RNA进行CK20特异性扩增,并分析产物是否存在CK20特异性扩增带的表达;为确保巢式RT-PCR技术的客观、准确性,在操作的同时,利用GAPDH特异性引物进行GAPDH的扩增,作为阳性对照;③以专用NMP22试剂盒,利用ELISA方法对尿标本进行NMP22的检测.对三种方法检测所得结果进行统计分析,比较三者对膀胱移行细胞癌的筛检临床意义,以及联合三种方法,对膀胱移行细胞癌进行筛检的临床意义.
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