本文利用紫外吸收光谱法研究了一氧化氮（NO）与辣根过氧化物酶（HRP）的结合，并在此基础上通过二阶导数光谱法建立了一种检测NO的新方法。　　 在无氧的0.2mol/L pH7.4磷酸盐缓冲溶液中，用紫外分光光度计法研究了HRP与NO的结合。根据HRP与NO结合平衡方程，推导出一种评定结合常数的模型方程，并计算出结合常数为（1.55±0.06）×104L/mol，说明在无氧条件下，HRP与NO能形成稳定的复合物。在H2O2和NO存在下，根据HRP催化氧化愈创木酚的初始反应速率证明了NO对HRP的抑制类型，由Lineweaver-Burk法确定为明显的非竞争性抑制并建立了抑制机理。由动力学机理求得结合常数为（5.22±0.06）×104L/mol。两种方法求得的结合常数几乎相等，进一步说明了非抑制竞争机理是合理的。这种由乒乓机理催化双底物的非竞争抑制模型也同样适合NO对其它金属酶相互作用的研究。　　 根据HRP与NO之间的反应，用二阶导数光谱法建立了一种检测NO的新方法。探讨了HRP浓度和pH值对NO-HRP体系的影响，优化了实验条件。在最佳实验条件下，研究了共存物质如NO2-，NO3-，H2O2对NO浓度检测的影响。建立了标准曲线的回归方程：h=8.89×10-2CNO-1.56×10-3，其NO检测的线性浓度范围为0.085-1.3μM，相关系数r=0.9966（n=5）。此方法的相对标准偏差均小于3％，检出限为0.032μM（S/N=3）。该方法成功地应用于检测血清样品中的NO的浓度。