中药辅助骨髓干细胞移植治疗DMD和中药体外诱导骨髓间质干细胞定向分化的实验研究

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Duchenne型肌营养不良症(Duchenne Muscular Dystrophy,DMD)是一种X连锁隐性遗传病,以进行性四肢近端骨骼肌萎缩无力、小腿腓肠肌假性肥大为特征,是最常见的神经肌肉疾病.患者多于20岁左右因呼吸衰竭和心力衰竭而死.其病因是由于X染色体的抗肌萎缩蛋白基因突变,导致其编码的细胞骨架蛋白(Dystrophin,DYS)缺乏.几年来,我们用体外培养的骨髓细胞移植到mdx和dko鼠,得到相似的结论.DMD的骨髓干细胞移植为同种异基因移植,需进行大剂量放疗预处理,对受体产生损伤,而且会出现移植物抗宿主病等并发症;目前的骨髓干细胞移植研究结果显示,应用骨髓移植治疗DMD的移植效率都较低,导致肌力改善不大.中医药在防治放化疗损伤、促进造血重建等方面颇有成效,有实验结果显示,一些中药对移植后的供体细胞增殖有显著促进作用,这些作用对DMD的骨髓干细胞移植治疗大有益处.本研究根据中医药理论和文献资料选择6种中药辅助骨髓干细胞移植对mdx鼠进行治疗研究,观察它们对移植小鼠生存率、GVHD症状、肌肉病理和dys表达量的影响,寻找提高治疗效果的药物和用药方案,期使骨髓干细胞移植治疗DMD得以最终在临床上有效应用.骨髓干细胞中的间质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)是近年来的研究热点,它具有多方向的分化潜能,体外易于培养和增殖,由于不表达主要组织相容性复合物MHC Ⅰ和Ⅱ类抗原与共刺激因子而不引起T淋巴细胞识别所产生的免疫反应,利于细胞移植治疗.MSC能分化为肌细胞,我们希望找到具有诱导其向肌细胞分化的中药用于辅助治疗.本研究拟在体外分离培养MSC,选用辅助治疗中能够促进dys表达的中药对其进行诱导,并以5-氮杂胞苷为对照,观察中药的诱导作用.另外,在同样的MSC培养体系中,选用本研究组已涉及研究的丹参,自制其水提液和醇提液,观察、比较二者对MSC的神经细胞方向的诱导作用,为相关神经系统疾病的替代治疗提供实验依据.
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