TNF-α反义核酸在治疗小鼠肺部炎症中的应用

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哮喘型肺炎是由多种细胞(如嗜酸性粒细胞、肥大细胞、T淋巴细胞、中性粒细胞、气道上皮细胞等)和细胞组分共同参与的气道慢性炎症,是一种严重危害患者身体健康的常见慢性呼吸道疾病,而且发病率高,目前已成为全世界范围内最常见的慢性疾病之一。近20年来,哮喘的患病率尤其是儿童哮喘的患病率有了明显的升高。儿童和青少年多见外源性哮喘属于Ⅰ型超敏反应。Ⅰ型超敏反应又叫过敏反应,指由肥大细胞、嗜碱性粒细胞释放大量过敏介质而造成的一组临床征候群,其主要表现为局部血管扩张、血管通透性增高、器官平滑肌收缩及腺体分泌增强。IgE类型的抗体是这类反应的始动因素,而’TNF-a可启动炎症级联反应,所以,TNF-a与IgE在哮喘的发生中发挥着重要的作用。为了研究TNF-a反义核酸在治疗哮喘型肺炎中的作用,我们构建了以OVA刺激的Balb/c小鼠过敏型模型,在小鼠模型28天的时候,通过鼻腔滴注的方式进行TNF-a反义核酸原位给药,在第32天的时候处死小鼠。通过肺部灌洗的方式检测灌洗液中TH2细胞,Treg细胞的变化比例;灌洗液上清进行炎症因子TNF-α,IL-4, IL-5, IL-6, IL-13,INF-γ, IL-10, TGF-β的变化水平;通过免疫组化的方式检测TNF-α在肺组织的分布;利用组织切片染色,Western,Q-PCR等检测技术在组织水平对哮喘型肺炎发生发展过程中的各项指标进行分析。同时提取肺部原代上皮细胞进行细胞水平的体外实验,在体内和体外条件下研究TNF-α反义核酸在小鼠哮喘型肺炎中的机理研究。
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