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TCR／CD3复合物既能够引起T细胞的激活，也能诱导其凋亡。本实验室过去的研究表明，CD3ε可以单独介导T细胞的激活及凋亡，并且其胞浆区ITAM中两个酪氨酸残基为细胞激活与凋亡信号传递所必需。抗CD8抗体可以诱导稳定表达CD8胞外区、跨膜区与CD3ε胞内区的融合分子(CD8ε)Jurkat T细胞(TJK)激活后凋亡，而CD8ε-ITAM中两个酪氨酸残基突变为苯丙氨酸(Y170F，Y181F)后，稳定表达此3种突变型融合分子的细胞株(T1JK、T2JK和T3JK)经抗体刺激不发生凋亡。 本研究以野生型TJK及3种突变型T1JK、T2JK和T3JK细胞为材料，以抗CD8抗体刺激后，研究PI3K／Akt和Ras／Raf-1两条信号途径在CD3ε介导的细胞激活及凋亡过程中的变化，以及CD8ε-ITAM中两个酪氨酸残基对这两条信号途径的影响。结果发现：在抗体刺激后，野生型TJK细胞中PI3K和Akt的激酶活性和表达量都明显增加，但突变型T1JK、T2JK和T3JK细胞经抗体刺激后，PI3K和Akt的激酶活性和表达量都没有明显的变化。PI3K专用抑制剂Wortmannin可以抑制PI3K和Akt的表达和激酶活性，并能抑制TJK细胞中凋亡相关蛋白酶CPP32的活化而抑制凋亡。TJK细胞转染PI3K显性负(dominant negative)表达质粒CMV-myc-△p110后，抗CD8抗体的刺激，可使CPP32的活化明显受到抑制。TJK细胞转染野生型CMV-myc-p110表达质粒与转染相应空载体的阴性对照相比，抗CD8抗体的刺激后，使CPP32的活化减弱，但比PI3K显性负表达质粒转染的细胞要强，提示PI3K／Akt的信号传递作用可以调控T淋巴细胞激活与凋亡。 在抗CD8抗体诱导TJK细胞激活过程中，Ras和Raf-1的表达量增加，Raf-1的激酶活性明显增加；突变型T1JK、T2JK和T3JK中细胞Ras和Raf-1表达的增加与TJK类似，Raf-1的激酶活性基本没有变化。在细胞凋亡过程中，4种细胞的Ras和Raf-1表达量及Raf-1激酶活性均无显著变化。PI3K专用抑制剂Wortmannin对Ras和Raf-1的表达，以及Raf-1的激酶活性没有直接的影响。而TJK细胞转染Ras显性负表达质粒CMV-N17ras与转染了Ras空载体质粒的阴性对照相比，抗CD8抗体的刺激，使CPP32的活