木薯淀粉和甘蔗木聚糖生化特性的研究

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六碳葡聚糖(淀粉)和五碳木聚糖均是碳水化合物中最重要的生物质能源,是地球上所有生物赖以生存的物质基础,更是与人类的生产和生活息息相关。随着科学技术手段的不断进步,对其广泛应用提出了更高水平的要求,而这些目标的实现都是建立在其特性基础之上。本实验选用六碳葡聚糖木薯淀粉和甘蔗五碳木聚糖为材料,对其生化特性进行研究。以自制的木薯淀粉为原料,采用正丁醇反复结晶法制备直链淀粉和支链淀粉,并对原淀粉以及直、支链淀粉进行定性、定量测定。其中用淀粉与碘的颜色反应进行定性,可观察到各淀粉溶液的颜色及对照有明显差异。利用提取的小麦淀粉酶对纯化后的直链淀粉和支链淀粉进行酶解,通过测定还原糖的含量可实现对淀粉各组分的定量测定。测得原淀粉以及直、支链淀粉样品的百分率分别为75、96和66%。其中,支链淀粉数值较低,反映出了分支程度的大小,该数据与分支程度成反比。分支程度是淀粉特性的直接反映,影响到许多物理及化学性质。为木薯淀粉各组分的进一步分级与检测研究提供理论基础。原淀粉中直链淀粉的定量。采用纯化的直、支链淀粉样品不同比例进行混合,在620nm处测定吸光度,得到标准曲线为y=1.0128x+0.0462,R~2=0.9994。依据该曲线,测得直链淀粉的质量分数为0.181,这与木薯淀粉中直链淀粉含量相吻合。可用粒度筛分法、水相分段自然沉降法以及不同温度下的分段溶解法等对木聚糖分子进行物理筛选,木聚糖分子为不定形的聚合物,颗粒外部形状因生产批次的不同而有所差异。五碳木聚糖、六碳葡聚糖溶液运动粘度特性差异较大,木聚糖溶液的运动粘度与其浓度呈类似线性的关系,在相同的浓度条件下远远低于原淀粉以及支链淀粉,而原淀粉的运动粘度呈迅速上升的趋势。确定酸水解1mg木聚糖样品的最佳条件:1mol/L HCl用量为50mL,温度为100℃恒温水浴,时间为60min时还原糖转化率达到最高。小麦淀粉酶对木聚糖的消化性试验证实,小麦淀粉酶对木聚糖无任何消化性。从剑麻厂废水溶液中筛选到1株水解木聚糖的菌种,经产酶培养基培养,酶解木聚糖的最佳条件是:6000r/min离心15min制备菌液;酶解1mg木聚糖的温度60℃,pH值6.0和时间30min。在此最佳条件下酶解木聚糖样品证实,单一的酶不能完全降解木聚糖,需要多个酶的共同参与。而菌液只有对直链淀粉和支链淀粉有作用,对水苏糖有极小的作用,对直链淀粉的作用更大一些。
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