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目的:探讨NF-κB-P65在人正常肝细胞（HL-7702）中对苯巴比妥体外诱导UGT1A1基因表达的影响。方法:本研究的实验对象为人正常肝细胞（HL-7702）。1.常规复苏和培养人正常肝细胞,细胞种板后使用CCK-8方法检测不同通路抑制剂吡咯烷二硫氨基甲酸（Pyrrolidinedithiocarbamic acid,ammonium salt,PDTC）浓度（5、10、20、50 umol/L）预处理细胞1小时后对细胞存活率的影响。根据CCK-8实验检测结果,结合相关文献及预实验中不同浓度PDTC的抑制效果;选用本研究中最佳抑制浓度的PDTC 10 umol/L抑制NF-κB通路。根据本课题组前期苯巴比妥的CCK-8实验结果,在本次研究课题中继续选择的苯巴比妥最佳药物浓度为2 mmol/L。2.将人正常肝细胞分别随机分为对照组、PDTC组、PB组以及PB+PDTC组。对照组用1640培养基培养;PDTC组使用10 mmol/L PDTC预处理1小时随后使用1640培养基培养24小时;PB组用含2 mmol/L苯巴比妥的1640培养基处理24小时;PB+PDTC组用10 mmol/L PDTC预处理1小时随后用含2 mmol/L苯巴比妥的1640培养基培养24小时。3.常规复苏和培养人正常肝细胞并分为对照组和PB组。随之,上述分组细胞目的基因（UGT1A1、NF-κB-P65）的mRNA表达水平检测采用常规的RT-q PCR;分组细胞目的基因的蛋白表达检验采取Western blotting方法进行检测。4.将人正常肝细胞复苏和培养后分为对照组、PDTC组,PB组,PB+PDTC组;随后采用RT-q PCR、Western blotting各自检验上述分组细胞中UGT1A1的mRNA及其蛋白水平的表达差异。结果:（1）苯巴比妥对HL-7702细胞UGT1A1基因及NF-κB-P65的mRNA表达水平的影响RT-q PCR实验结果显示,HL-7702细胞经与苯巴比妥孵育24小时后,与对照组相比,苯巴比妥组中的UGT1A1 mRNA的表达（1.3±0.46）较对照组（0.45±0.076）明显增加（P＜0.05）,约为对照组表达量的2.86倍。同时,苯巴比妥组中的NF-κB-P65 mRNA的表达量（0.80±0.53）较对照组（0.34±0.12）明显增加（P＜0.05）,约为对照组表达量的2.37倍。（2）苯巴比妥对HL-7702细胞UGT1A1基因及NF-κB P65的蛋白水平的影响Western blotting实验结果显示,HL-7702细胞经与苯巴比妥孵育24小时后,与对照组相比,苯巴比妥组中的UGT1A1的蛋白表达（1.16±0.08）与对照组（0.96±0.11）相对比,苯巴比妥组明显增加（P＜0.05）,约等于对照组表达量的1.21倍。同时,苯巴比妥组中的NF-κB-P65的蛋白表达量（1.29±0.18）较对照组（0.83±0.16）明显增加（P＜0.05）,约为对照组表达量的1.56倍。（3）PDTC对HL-7702细胞成活率的作用CCK8实验结果显示,在PDTC浓度为5、10、20、50μmol/L下,HL-7702各组细胞的存活率均在90%以上,提示NF-κB通路抑制剂PDTC预处理HL-7702细胞1小时对细胞存活率没有太大的影响。（4）NF-κB通路抑制剂PDTC对苯巴比妥激活的NF-κB-P65的抑制作用在实时荧光定量PCR实验中,加入通路抑制剂PDTC（10μmol/L）预处理HL-7702细胞1小时后与苯巴比妥共孵育24小时。实验结果显示,与苯巴比妥组相比,PDTC能抑制NF-κB-P65的mRNA表达。同时,Western blotting实验结果显示,与苯巴比妥组相比,通路抑制剂PDTC能抑制NF-κB-P65的蛋白表达。（5）通路抑制剂PDTC对苯巴比妥诱导HL-7702细胞UGT1A1 mRNA表达水平的影响实时荧光定量PCR实验结果显示,HL-7702细胞经PDTC预处理1小时,随后再与苯巴比妥共孵育24小时,与苯巴比妥组相比,PB+PDTC组中的UGT1A1 mRNA的表达（1.46±0.48）相较苯巴比妥组（1±0.06）明显增加（P＜0.05）,约为苯巴比妥组表达量的1.46倍。（6）通路抑制剂PDTC对苯巴比妥诱导HL-7702细胞UGT1A1蛋白表达水平的影响Western blotting实验结果显示,HL-7702细胞经通路抑制剂PDTC预处理1小时,随后再与苯巴比妥孵育24小时,与苯巴比妥组相比,PB+PDTC组中的UGT1A1的蛋白表达（1.31±0.08）相较苯巴比妥组（1±0.08）显著增加（P＜0.05）,约为苯巴比妥组表达水平的1.31倍。结论:1.苯巴比妥可以诱导HL-7702细胞中UGT1A1基因及NF-κB-P65的mRNA和蛋白表达。2.NF-κB通路抑制剂PDTC可以增强苯巴比妥对UGT1A1的mRNA和蛋白的诱导作用。3.HL-7702细胞中NF-κB-P65可能在一定程度上阻碍了苯巴比妥对UGT1A1的诱导。