清湿化瘀法对AM模型小鼠雌激素效应相关因子p-STAT3、17β-HSDⅠ、17β-HSDⅡ时空变化影响的研究

来源 :成都中医药大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:shuper
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目的采用作为院内制剂应用多年并取得明显疗效的清湿化瘀法代表方(内异康复片),观察其对AM小鼠雌激素效应相关因子p-STAT3、17β-HSDI、17β-H SDII在不同动情周期、在位和异位内膜表达的影响;探究清湿化瘀法通过调控雌激素效应治疗AM的机制,提供内异康复片临床推广及应用于AM治疗的科学证据。方法在8周龄ICR雌性小鼠右侧宫腔内注入同种雄鼠垂体悬浊液,建立AM模型。造模完成后采用随机数字表法分为以下7组:内异康复片(NYKFP)低、中、高剂量组、丹莪妇康煎膏组(DEFKJG)、孕三烯酮组(GES)、3组模型组(3M)、6月模型组(6M),另有假手术组(Sham)及正常组(Normal),每组24只。常规喂养3月后,正常组、假手术组、3月模型组在动情期和间情期各处死小鼠12只。剩余组灌胃3月后同样在动情期和间情期各处死12只。将小鼠的子宫标本进行病理切片、HE染色,通过观察AM严重程度分级评分,结合评分比较建立AM模型前后、药物干预前后子宫内膜的病理变化;免疫组化技术检测小鼠子宫p-STAT3、17β-HSDI、17β-HSDII随时空变化的表达差异。结果1.AM病理机制研究结果:AM严重程度分级评分,与正常组比较,假手术组无显著差异(P>0.05),3月模型组和6月模型组显著升高(P<0.05);6月模型组高于3月模型组(P<0.01)。p-STAT3、17β-HSDI的表达,与正常组比较,假手术组无显著差异(P>0.05),3月模型组及6月模型组显著升高(P<0.01);6月模型组高于3月模型组(P<0.01)。17β-HSDII的表达,与正常组比较,假手术组无显著差异(P>0.05),3月模型组及6月模型组显著降低(P<0.01);6月模型组低于3月模型组(P<0.01)。2.内异康复片治疗AM药效及机制研究结果:AM严重程度分级评分,与6月模型组比较,内异康复片低剂量组差异无统计学意义(P>0.05),其余各治疗组评分显著降低(P<0.05)。p-STAT3、17β-HSDI的表达,内异康复片中、高剂量组、丹莪妇康煎膏组及孕三烯酮组对比6月模型组均显著下降(P<0.01),内异康复片高剂量组低于丹莪妇康煎膏组及孕三烯酮组(P<0.01),内异康复片低、中、高剂量组两两比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。17β-HSDII的表达,内异康复片中、高剂量组、丹莪妇康煎膏组及孕三烯酮组对比6月模型组均显著升高(P<0.05),内异康复片高剂量组高于丹莪妇康煎膏组及孕三烯酮组(P<0.01),内异康复片低、中、高剂量组两两比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。3.除孕三烯酮组在位内膜p-STAT3及17β-HSDI动情期较间情期的表达无显著差异(P>0.05);剩余各模型组p-STAT3、17β-HSDI的表达,动情期高于间情期(P<0.05);17β-HSDII的表达,间情期高于动情期(P<0.01)。各模型组p-STAT3、17β-HSDI在异位内膜的表达高于在位内膜(P<0.01),17β-HSD II在异位内膜的表达低于在位内膜(P<0.01)。4.AM分级评分与p-STAT3、17β-HSDI的表达存在正的相关关系,与17β-HSDII的表达存在负的相关关系(P<0.05)。p-STAT3与17β-HSDI的表达存在正的相关关系,p-STAT3与17β-HSDII、17β-HSDI与17β-HSDII的表达存在负的相关关系(P<0.01)。结论1.本研究提示,AM的发生与子宫内膜雌激素效应相关因子p-STAT3和17β-HSDI的高表达,17β-HSDⅡ的低表达存在相关性。2.内异康复片可降低雌激素效应相关因子p-STAT3、17β-HSDI、上调17β-HSDⅡ于子宫在位内膜及异位内膜的表达,减少E2的活化影响AM的发生与发展;同时可降低雌激素对STAT3的表达及活化,下调磷酸化的核转录因子p-STA T3,从而降低AM中异位内膜组织的侵袭性,发挥治疗AM的作用。3.内异康复片对磷酸化的核转录因子p-STAT3、雌激素代谢酶17β-HSDI、17β-HSDⅡ的调控力度存在剂量相关性,高剂量>中剂量>低剂量;且高剂量内异康复片的调控力度优于丹莪妇康煎膏和孕三烯酮。4.子宫中的雌激素效应相关因子—p-STAT3、17β-HSDI、17β-HSDⅡ存在周期性表达,它们的表达与高雌激素反应相互增强,在动情期引起的雌激素效应较间情期高,可据此选择治疗AM的最适宜用药时间。
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