【摘 要】
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溃疡性结肠炎（Ulcerative colitis,UC）是一种严重损害患者生活质量的慢性炎症性肠病（IBD）,目前的药物只能起到缓解作用,但副作用很大,因此寻找安全有效的天然干预物质是一个有潜力的策略。亚麻籽蛋白是一种具有减轻炎症、清除体内自由基和抑制微生物生长等功效的优质食源性蛋白,具有很高的开发利用价值。百香果外果皮富含具有抗氧化活性的花色苷（Anthocyanin,ACN）物质,具有很高的
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溃疡性结肠炎（Ulcerative colitis,UC）是一种严重损害患者生活质量的慢性炎症性肠病（IBD）,目前的药物只能起到缓解作用,但副作用很大,因此寻找安全有效的天然干预物质是一个有潜力的策略。亚麻籽蛋白是一种具有减轻炎症、清除体内自由基和抑制微生物生长等功效的优质食源性蛋白,具有很高的开发利用价值。百香果外果皮富含具有抗氧化活性的花色苷（Anthocyanin,ACN）物质,具有很高的市场前景。本实验将绿色健康的食源性亚麻籽分离蛋白（Flaxseed protein isolate,FPI）与ACN结合以及对FPI进行酶解获得亚麻籽分离蛋白-花色苷（FPI-ACN）复合颗粒和亚麻籽蛋白酶解物（Flaxseed proteolysates,FP）并应用于溃疡性结肠炎,为改善溃疡性结肠炎提供新的方法和理论依据。本研究利用响应面法优化提取百香果外果皮ACN,然后将经过AB-8大孔树脂纯化后的ACN与FPI结合制备FPI-ACN复合颗粒并研究其体外活性和稳定性。结果显示ACN浓度为0.15%制备的FPI-ACN复合颗粒的抗炎和抗氧化活性最高（对白蛋白变性抑制率为95.68±2.96%,DPPH·清除率为83.97±1.33%,ABTS+清除率为99.44±0.56%,·OH清除率为93.74±1.39%）,体外胃肠消化稳定性优于游离花色苷。以5-氨基水杨酸（5-ASA）为阳性对照药物,将不同剂量FPI-ACN复合颗粒（400、800 mg/kg/day）灌胃DSS小鼠,通过测定结肠炎症状、炎性因子含量、氧化应激和肠道菌群,探究FPI-ACN复合颗粒对小鼠溃疡性结肠炎的干预作用。结果显示FPI-ACN复合颗粒显著减轻结肠炎性症状,减少炎性因子,有效增加小鼠的抗氧化能力,调节初始菌群组成,改善结肠炎效果优于5-ASA。利用木瓜蛋白酶酶解亚麻籽分离蛋白获得亚麻籽蛋白酶解物（FP）,以白蛋白变性抑制率、抗氧化活性和抑菌率作为优化制备条件的指标,根据单因素的实验结果获得最佳制备条件为加酶量为6000 U/g,底物浓度为2%,水解时间为0.5 h。通过最佳条件制备获得的FP具有良好的抗炎和抗氧化活性,当FP的肽浓度为15mg/m L时,对白蛋白变性抑制率为50.83%,DPPH·清除率为67.87%,·OH清除率为94.66%,超氧阴离子清除率为30.18%。利用3%DSS构建小鼠溃疡性结肠炎模型,并以不同剂量FP（400、800mg/kg/day）灌胃DSS小鼠,通过测定结肠炎症状、炎性因子含量、氧化应激、肠道菌群和免疫印迹（Western Blot）,探究FP对小鼠溃疡性结肠炎的干预作用及潜在机制。研究表明高剂量（HFP）组和低剂量（LFP）组均可以通过减轻结肠炎性症状,减少炎性因子,有效增加小鼠的抗氧化能力,调节初始菌群组成和抑制炎症相关的NF-κB信号通路的表达来有效缓解肠道损伤,从而对UC小鼠发挥良好的治疗作用。
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