辛伐他汀-胶原蛋白复合海绵用于大鼠磨牙直接盖髓的实验研究

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目的:  将辛伐他汀-胶原蛋白复合海绵作为盖髓材料,应用于大鼠磨牙直接盖髓术中,观察术后牙髓组织的生物学反应及修复性牙本质形成情况,探讨其作为盖髓材料的疗效及可行性。  方法:  制备辛伐他汀-胶原蛋白复合海绵,并通过扫描电子显微镜观察其结构。120只SD大鼠随机分成三组,即辛伐他汀-胶原蛋白海绵组(简称SIM组)、胶原蛋白海绵组(简称CS组)及氢氧化钙组(简称CH组),每组40只。在每只大鼠左上颌第一磨牙咬牙合面开髓,分别用辛伐他汀-胶原蛋白复合海绵,胶原蛋白海绵,氢氧化钙直接盖髓,玻璃离子充填,并设对侧上颌第一磨牙为正常对照组。在术后第1d、3d、7d、14d、28d采用心脏灌注的方法处死实验动物,固定标本。进行大体观察、拍摄X线片、HE及Massonˊs Thichroe染色,观察盖髓材料的降解情况、牙髓组织生物学反应以及牙本质桥的形成情况;运用免疫组化染色观测VEGF、BMP-2在牙髓损伤修复过程中表达的情况。  结果:  1.扫描电镜结果:辛伐他汀-胶原蛋白复合海绵电镜下呈多孔三维网状结构,孔隙大小及分布都比较均匀。  2. X线片结果:各组均未出现根尖周阴影,CH组术后第28d在穿髓孔处有高密度阻射影,并封闭穿髓孔;SIM组术后第14d、28d在穿髓孔处均有高密度阻射影,且都封闭了穿髓孔;CS组第28d在穿髓孔远中有高密度阻射影,但未封闭穿髓孔。  3. HE及Masson′s Thichroe染色结果:在不同的时间点,三组中可观察到不同的炎症反应,SIM组的炎症反应程度比CH组的要轻,在术后第14d两者存在统计学差异(P<0.05);三组中CS组的炎症程度最重,SIM组与CS组的炎症反应程度在术后第14d、28d存在统计学差异(P<0.01)。在观察期间内,与另外两组相比,SIM组修复性牙本质形成的速度更快、质量更好,在术后第14d,SIM组与CH组、CS组存在统计学差异(P<0.05),且在术后第28d, SIM组、CH组与CS组均存在统计学差异(P<0.05)。  4.免疫组化染色结果:在正常牙髓组织中BMP-2呈阴性表达,VEGF在血管内皮细胞中呈阳性表达。在实验组 VEGF、BMP-2的表达强度都呈现出先升高后降低的变化,VEGF在第3d达到峰值,而BMP-2在第7d达到最大值,两者都主要在血管内皮细胞、成纤维细胞、成牙本质细胞、中性粒细胞等细胞的胞质中表达。各实验组中VEGF及BMP-2的表达水平除了术后第28d外,其他时间点与正常牙髓组织的相比均有显著性差异(P<0.01)。SIM组及CH组中VEGF的表达量在术后第1d、3d、7d显著高于CS组,且差异具有统计学意义(P<0.05);此外,与CH组相比,SIM组在术后第3d、7d VEGF的表达水平更高(P<0.05)。术后第3d、7d、14d SIM组及CH组BMP-2的表达强度要高于CS组(P<0.05);而SIM组与CH组则在术后第7d、14d表达存在显著性差异,SIM组BMP-2的表达要高于CH组(P<0.05)。  结论:  1.辛伐他汀-胶原蛋白复合海绵作为盖髓材料,术后牙髓组织的炎症反应程度轻,组织相容性好。  2.辛伐他汀-胶原蛋白复合海绵具有促进修复性牙本质形成的能力,与氢氧化钙相比,其促进修复性牙本质形成的质量更好、速度更快。  3.辛伐他汀-胶原蛋白复合海绵促进牙髓损伤修复的机制之一可能与其提高牙髓修复过程中VEGF及BMP-2的表达水平有关。  总之,辛伐他汀-胶原蛋白复合海绵制备简单,生物相容性好,促进修复性牙本质形成能力较强,作为盖髓材料具有良好的应用前景。
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