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血清4型禽腺病毒（Fowl adenovirus 4,FAdV-4）病是引起心包积液和包涵体肝炎为主要特征的一种急性、高度接触传染性疾病。2010年之前我国对该病的报道较少,但在2015年后在我国北方大量暴发,之后逐渐向全国蔓延,给养禽业带来巨大的经济损失。目前对FAdV-4的研究处于初始阶段,生物学特征及基因组功能尚不清楚,检测方法也主要针对抗原,尚无商品化的ELISA试剂盒,因此对FAdV-4生物学特性、全基因分析和抗体检测方法的研究对该病的防控具有重大意义。本研究于20152016年期间从我国10个省市自治区发病鸡场采集病样130余份,分离鉴定了83株禽腺病毒,其中81株为血清4型I亚群腺病毒,2株为血清8b型I亚群腺病毒。81株FAdV-4的主要分离地区集中在江苏、浙江、广东和云南等地区,2株FAdV-8b均分离自江苏。六邻体是主要的衣核蛋白,含有型、群、亚群特异性抗原决定簇,其遗传进化分析表明:81株FAdV-4的核苷酸同源性在98.7100%之间,同国内外已报导的毒株核苷酸同源性也在97%以上。本研究分别对华东、华南和西南地区的分离毒株（CH/JS/TCZHP2015、CH/GD/XCJFQ2016及CH/SC/MSLQH2016）进行全基因组测序分析,结果显示3株毒株之间的同源性及与国内近期的分离株CHSDDZ2015、C HSXC Z2015、CHJSXZ2015、CHAHBZ2015、CHHNJZ2015、HB1501、HB1510、SD1501和JSJ13之间的同源性均几乎一致,而同国外的代表株相比同源性有一定的差异（6%6.4%）,这证明FAdV-4从国外传入后的确产生了一些变异,此外近期的研究发现国内分离毒株与国外毒株相比存在ORF29变异和ORF19缺失的情况,但目前还不能确定是否是由于这种变异导致了此次国内腺病毒的暴发流行。为了研究FAdV-4的生物学特性,本研究建立了Taq Man荧光定量PCR方法,结果显示:构建的标准曲线在所选择的相应浓度范围内具有良好的线性关系,相关系数可达0.997,特异性、灵敏性和重复性均良好。用建立的Taq Man荧光定量方法对尿囊腔、卵黄囊和绒毛尿囊膜接种鸡胚后各组织带毒量进行检测,发现卵黄囊接种方式能使病毒在鸡胚内大量繁殖,且肝脏的毒价远高于其它组织。细胞繁殖实验表明:鸡肝癌细胞对FAdV-4的细胞培养具有较好效果,鸡成纤维细胞尽管能够繁殖病毒,但需要一定是的适应期,且繁殖效率较低。致病性试验表明3株FAdV-4分离株（CH/JS/TCZHP2015、CH/GD/XCJFQ2016及CH/SC/MSLQH2016）都具有高致病性(攻毒剂量为105.0EID50时,死亡率高达90%100%),组织嗜性检测证明FAd V-4对肝嗜性最强,其次为脾脏、胰腺和大肠。使用CH/JS/TCZHP2015毒株灭活乳化后制成的疫苗免疫后,对不同地区的毒株（CH/JS/TCZHP2015、CH/GD/XCJFQ2016及CH/SC/MSLQH2016）具有良好的交叉保护效果。本研究还选用Hexon蛋白Domain 1功能区和pCold-GST冷休克表达载体构建重组蛋白,低温诱导表达纯化后用作包被抗原建立间接ELISA方法。分别对包被条件、封闭液及封闭时间、一抗稀释比例及作用时间、二抗稀释比例及作用时间、显色液作用时间进行优化,最后确定纯化的蛋白稀释100倍以4℃包被过夜,使用1%的BSA封闭1 h,血清稀释200倍孵育1 h,酶标二抗2000倍稀释左右1h,室温显色10min时为最佳条件,阴阳性临界值为0.191。建立的方法具有良好的特异性、重复性和敏感性,可用于FAdV-4抗体检测。