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研究背景米非司酮(mifepristone,MIF)是国际上第一个用于终止妊娠的药物,与米索前列醇序贯使用提高了药物流产的成功率,广泛用于终止早、中期妊娠,对晚期妊娠引产也有潜在的应用价值。滋养细胞的锚定增殖分化、胚胎的植入、胎盘的形成是正常妊娠过程的关键。而米非司酮作为强有力的孕激素受体(progesterone receptor,PR)和糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)拮抗剂,能够有效的拮抗这两类激素,抑制滋养细胞的锚定增殖与分化,影响蜕膜和绒毛细胞外基质重构,诱发母-胎界面细胞凋亡等生理过程,进而使母-胎界面出现缝隙,导致出血,胚胎失锚定而脱落;另外米非司酮抗孕激素的生物效应作用在子宫产生收缩等机制,从而导致妊娠终止。虽然滋养层细胞在胚胎发育过程中属于正常组织细胞,但是它们在增殖、分化、浸润、迁移等生物学行为方面与肿瘤细胞相似。曾有学者[1]从细胞增殖与迁移、侵袭信号转导通路、血管侵袭、血管生成和细胞凋亡等方面阐述了囊胚滋养细胞与肿瘤细胞生物学行为的相似性。而TRIM蛋白参与多种细胞的增殖、分化、凋亡、免疫应答,尤其是在肿瘤的发生和发展过程中发挥极其重要的作用[2]。因此人早孕绒毛滋养细胞生物学行为极有可能也受TRIM蛋白调控。第一部分米非司酮和米索前列醇对人早孕绒毛组织TRIM22表达的影响目的检测3组人早孕绒毛组织(胚胎停育组、人工流产组、药物流产组)中TRIM22基因的表达水平;探讨米非司酮、米索前列醇用于药物流产可能存在的相关机制。方法将临床收集的40例人早孕绒毛组织标本分为胚胎停育组(A组)12例,人工流产组(B组)14例,药物流产组(C组)14例。采用免疫组化技术(超敏二步法)检测TRIM22蛋白在人早孕绒毛组织滋养细胞的表达部位并对其表达强度进行半定量分析。采用Western blotting和RT-qPCR检测TRIM22蛋白和mRNA表达水平并进行半定量分析。结果TRIM22蛋白主要表达在细胞滋养细胞的细胞核。TRIM22蛋白和mRNA的表达水平:B组显著高于A组和C组,差异有统计学意义(P<0.05),且A、C两组间比较无显著统计学差异(P>0.05)。结论在人早孕绒毛组织中能够检测到TRIM22蛋白和mRNA的表达,并且在正常早孕绒毛组织中表达水平较高。服用流产药物后TRIM22表达呈降低趋势,并且能达到与胚胎停育大致相同的水平。提示米非司酮与米索前列醇序贯使用可以降低人早孕绒毛组织TRIM22的表达水平,并且可能通过调控TRIM22的表达促使胚胎滋养细胞凋亡。第二部分米非司酮和米索前列醇对HTR-8滋养细胞TRIM22表达的影响目的分别检测米非司酮和米索前列醇作用后HTR-8滋养细胞的增殖能力、迁移能力,以及TRIM22mRNA和蛋白和的表达水平;进一步探米非司酮和米索前列醇在对TRIM22的表达调控方面是否存在明显交互作用。方法采用HTR-8细胞建立的人绒毛膜滋养层细胞(Extravillous trophoblast,EVT)为研究对象。按2×2析因设计随机分四组进行试验:空白对照组(D组)、米索前列醇组(E组)、米非司酮组(F组)、米非司酮+米索前列醇组(G组)。分别采用CCK-8实验和细胞划痕实验检测4组细胞经药物干预后的细胞增殖能力和迁移能力。采用Western blotting和RT-qPCR分别检测4组细胞经药物干预后的TRIM22蛋白和mRNA表达水平并进行半定量分析。结果使用米非司酮组(F组和G组)与未使用米非司酮组(D组和E组)间比较,HTR-8细胞的增殖能力和迁移能力显著下降,TRIM22mRNA和蛋白表达强度明显降(P<0.001);使用米索前列醇组(E组和G组)与未使用米索前列醇组(D组和F组)间比较无统计学意义差异(P>0.05);在对TRIM22表达调控方面两药物之间无明显交互作用(p>0.05)。结论米非司酮抑制了 HTR-8滋养细胞的增殖、迁移能力,并且可以下调其TRIM22的表达;米索前列醇对HTR-8细胞的增殖、迁移能力以及TRIM22的表达无统计学意义影响;两种药物之间无明显交互作用。米非司酮可能通过下调TRIM22的表达,抑制了滋养细胞的增殖、迁移能力,从而达到细胞凋亡的目的。