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本研究主要采用生物活性追踪法,对龙柏(Juniperuschinensiscv.kaizucaHort.)茎叶乙醇提取物进行了分离、纯化和鉴定,得到活性化合物A,经过红外与核磁共振测定,确定了化合物A的结构。主要研究结果如下:
1.采用了生长速率法测定了龙柏茎叶乙醇提取液对27种植物病原菌的抑菌活性,结果表明,龙柏茎叶乙醇提取液对供试菌种均有一定的抑制作用。在供试浓度为40mg/ml(以干物质计)时,对27种病原真菌都表现不同程度的抑制效果,抑菌率达到50%以上的有22种病原菌,其中对葡萄白腐病菌、棉花枯萎病菌、苹果炭疽病菌、葡萄黑痘病菌、苹果腐烂病菌、黄瓜疫霉病菌、番茄绵腐病菌和番茄绵疫病菌抑制率分别达到78.8%、70.9%、72.5%、81.3%、97.1%、72.7%、77.5%、和76.9%。
2.龙柏茎叶乙醇提取液经水悬浮后分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取,对各萃取相进行活性测定,结果发现石油醚相抑菌活性明显好于其他各相,在萃取物浓度为1mg/ml时,石油醚相萃取物对葡萄白腐病菌、苹果炭疽病菌、葡萄黑痘病菌、苹果腐烂病菌、小麦纹枯病菌、和番茄早疫病菌的抑制效果分别达到了78.7%、45.8%、52.9%、83.3%、38.9%和59.4%。
3.对石油醚萃取层进行硅胶柱层析,得到23个馏分。在浓度为1mg/ml时,馏分8对苹果腐烂病菌的抑制作用最好,抑制率达到了69.7%。对8号馏分进行进一步的分离,得到化合物A。
4.化合物A经红外及核磁共振鉴定,确定为4-松香酸。化合物A对苹果腐烂病菌的EC50为0.86mg/ml,这是关于4-松香酸的农用抑菌活性的首次报道。