单细胞中氨基酸及γ干扰素的分析

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该文第一章首先对毛细管电泳(CE)的基本原理进行了简单的介绍.其次对CE激光诱导荧光(LIF)检测单细胞分析进行了详细的综述.这一部分涉及到CE-LIF检测中激光器的构成及选择原则、天然荧光单细胞分析、化学标记荧光法单细胞分析、间接荧光法单细胞分析、催化荧光法单细胞分析.并对单细胞分析中涉及的其它检测的手段进行了简单介绍.该章共引用文献91篇.第二章中我们采用了细胞电穿孔的方法强制将衍生试剂异硫氰酸盐(FITC)导入血红细胞中,进行细胞内的衍生反应,以减少氨基酸在测定过程中的稀释.同时采用高分离效率的CE和高灵敏度的LIF检测方法,解决了单个人血红细胞(8μm,人最小细胞)中氨基酸(含量10<-17>mol以下)的检测这个难度较大的问题.我们共检测到了单个细胞中的Arg、Lys、Trp、Asn、Ser、Ala、Cys、Gly和Glu九种氨基酸,其含量为3.84~32.4×10<-18>mol.第三章中我们采用非竞争免疫方式的毛细管电泳免疫分析(CEIA)LIF检测测定了细胞因子:三种形式的重组人类γ干扰素(IFN-γ).第四章和第五章中我们提出了一种新的测定单细胞中抗原的方法,即毛细管电泳柱上免疫或细胞内免疫LIF检测单细胞方法.第六章中研究出了一种细胞表面免疫反应连续测定单细胞中抗原的方法,克服了常用的单细胞分析中的缺陷(如:人工单细胞进样、溶膜、检测的费时和复杂流程,低的分析速度.).
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