本研究选用中国水产科学研究院黄海水产研究所培育的"壬海1号"凡纳滨对虾(Litopenaeusvannamei)新品种,利用单因子浓度梯度法,通过在基础饲料中添加不同质量分数的聚β-羟基丁酸醋(poly-β-hydroxybutyrate,PHB)比较对凡纳滨对虾生长性状、相关的非特异性免疫基因的影响,以期获得PHB在水产养殖中的理论支持。具体研究结果如下:1.选取同一家系生长状况良好的360尾大小均匀、体型正常的凡纳滨对虾仔虾,分为6组,每组3重复。实验对虾分别用含0.0%(即不含PHB的空白对照组)、0.5%、1.0%、2.5%、5.0%、10.0%PHB的饲料投喂凡纳滨对虾6周,实验结束时计算其存活率,增长率,非特异性免疫酶活力等。实验结果显示PHB对对虾存活率无影响(P<0.05);在PHB浓度不高于2.5%时,PHB能提高对虾的体重增长率等,但在5.0%和10.0%PHB浓度组中其生长性能反而受到抑制。对对虾体内不同组织中免疫酶活进行测定,发现在PHB浓度为1.0%-2.5%时对虾的免疫酶活性上升。以上结果表明,1.0%-2.5%PHB浓度为最适浓度,该浓度范围内显著促进L.vannamei的体重增长及非特异性免疫酶活力。2.利用生长测试实验材料,选取0.0%及2.5%PHB浓度组,对其进行氛氮胁迫实验。在养殖水体中加入氯化铵(NH4Cl),使水体中氨氮终浓度为15mg/L。实验中取0、3、6、12、24、48 h的凡纳滨对虾,测定其鳃丝、肝胰腺、肌肉及血淋巴中免疫因子的基因表达量。实验结果显示,饲喂2.5%PHB的对虾体内丙二醛(Malonaldehyde,MDA)含量均低于空白对照组,且免疫基因表达量高于不含PHB的对照组。相对于对照组,投喂2.5%PHB的对虾体内免疫基因表达量均高于对照组。在氨氮胁迫后,血淋巴中超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)及过氧化物酶(peroxidase,CAT)基因表达比值呈现先上升后下降再上调的趋势,到48h表达量是对照组的3.81倍和1.56倍(P<0.05)。相对于血淋巴,肝胰腺及鳃中sod和cat活力则呈现略微下降后上升,表达水平与Oh无显著差异(P>0.05)。而谷胱甘肽过氧化物酶(glutathion peroxidase,Gsh-px)、溶菌酶(lysozyme,LZM)基因表达在肝胰腺中均呈现先上升后下降的趋势,至实验结束时仍是对照组的2.24倍和2.36倍。而在血淋巴及鳃中gsh-px和lzm比值在胁迫后略微下降后上升再下降。实验结果表明,P HB对氨氮胁迫下的凡纳滨对虾具有一定的保护作用。3.选取同一家系平均体重为3.95-4.52 g的同一家系的凡纳滨对虾分为6组,分别用含 0.0%((即不含 PHB 的空白对照组)、0.5%、1.0%、2.5%、5.0%、10.0%PHB的饲料投喂投喂,4周后通过肌肉注射鳗孤菌悬液方式使其感染鳗孤菌,每组6重复(30尾/重复):3重复用于统计感染鳗弧菌后对虾死亡率,3组用于取样。实验结束后统计各组对虾存活率并选择免疫保护率(RPS)最高组,利用实时荧光定量PCR技术测定感染鳗弧菌后48 h内免疫基因表达量。结果发现对虾的存活率随PHB浓度升高呈现先上升后下降再上升的趋势,饲喂PHB的实验组对虾平均存活时间均高于未饲喂PHB的实验组;且饲料中含有1.0%PHB对对虾的免疫保护率最高。对比1.0%PHB及空白组血淋巴免疫基因表达水平,发现1.0%PHB组对虾体内免疫基因表达水平高于空白对照组。实验结果说明,PHB能增强凡纳滨对虾抵抗鳗孤菌感染的能力。4.选取同一家系平均体重为3.95-4.52 g的凡纳滨对虾分为6组,每组6重复:3重复用于统计感染白斑综合症病毒(whitespotsyndromevirus,WSSV)后对虾死亡率,3组用于取样。以含不同质量分数(0.0%,0.5%,1.0%,2.5%,5.0%,10.0%)PHB的人工配合饲料饲喂凡纳滨对虾20天后,经人工注射的方式使对虾感染WSSV;利用实时荧光定量PCR技术分析PHB对凡纳滨对虾抵御WSSV侵染能力的影响,并选择最高免疫保护率(RPS)组进行不同时间点基因表达量分析。研究发现,经PHB饲喂的对虾在感染WSSV后与未饲喂PHB的对虾存活率无显著影响(P>0.05);但感染WSSV的对虾平均存活时间随PHB浓度上升呈现先上升后下降再上升的趋势,饲喂PHB对虾的平均存活时间均高于对照组,其中1.0%PHB浓度组对虾平均存活时间最长,且显著高于空白对照组及5.0%PHB实验组(P<0.05)。分析各组对虾体内病毒含量,发现1.0%PHB浓度组对虾病毒含量在实验前期显著低于对照组(尸<0.05)。对虾感染WSSV后,对对照组及1.0%PHB实验组对虾前48 h内6个采样时间点的sod、cat、gsh-px、lzm及abp5个基因进行表达趋势分析,结果表明投喂PHB的对虾在感染WSSV后血淋巴中sod、cat、gsh-px和lzm表达量呈现上升后下降再上升趋势且分别在6 h,6 h,3 h,6 h达到最大值;abp在WSSV感染3 h内急速下降,随后在12 h达到最大值后又下降;另外饲喂PHB对虾体内免疫基因表达量均高于对照组。结果说明,PHB能够提高凡纳滨对虾对WSSV的抵抗力,且在一定程度上提高了对虾的免疫力。本研究主要研究聚β-羟基丁酸酯对水产养殖物种凡纳滨对虾的影响,探究PHB对其生长及抗病能力的影响,旨在开发一种新的免疫增强剂,同时扩展PHB在水产养殖行业的应用。