核酸(DNA或RNA)纯化是分子生物学下游实验和核酸水平临床检测的重要前提，纯化总体原则是高纯度核酸样品的获得和保证核酸结构的完整性。现有核酸纯化方法包括酚一氯仿抽提，高盐沉淀，离子交换和选择性吸附等。但方法存在不环保(使用有毒试剂)，操作繁琐(多次离心)，无法实现高通量(难以大规模自动化操作)等缺点。纳微米超顺磁性复合微粒，在核酸纯化方面体现出较大优势，与现有核酸纯化技术相比，无需离心，操作简便快速，能够实现高通量，自动化。国外已有以磁性复合微粒为载体纯化核酸的相关试剂盒产品，国内在此方面的研究与开发还较为落后。 本研究以我国自主知识产权的新型磁性复合微粒一金磁微粒为载体，建立了从大鼠肝脏纯化总核酸(即基因组DNA和总RNA)的方法。选择硫氰酸胍(Guanidin。Thiocyanate，GTC)裂解体系，将裂解后的样本与金磁微粒混合，总核酸将结合在金磁微粒表面，经过清洗后将吸附在金磁微粒表面的总核酸即可洗脱下来。纯化得到的总核酸在260 11111处有特征紫外吸收峰，凝胶电泳分析可见基因组DNA和28S RNA及18S RNA条带，其28S与18S RNA条带的比例约为2：1。建立的方法也适用于大鼠心、脾、肺、肾等组织的总核酸纯化。将该方法初步用于其它生物样本如细胞、细菌、植物、全血总核酸的纯化，同样获得较为理想的结果。 对建立的金磁微粒纯化总核酸的方法进行系统评价，结果表明：金磁微粒纯化核酸回收率为80％，方法的批内差从5.06％到16.29％，批间差从4.22％到20.5％，可稳定用于肝脏组织总核酸纯化。纯化得到总核酸作为模板用于B.action基因的RT-PCR反应，能够扩增出目的片段，说明总核酸样品纯度高，不含抑制RT-PCR.反应的抑制剂。 不经总核酸洗脱步骤，用DNase消化金磁微粒.总核酸复合物，可以得到总RNA。该方法能够从10 mg大鼠肝脏中纯化得到约40 lxg总RNA，OD260/OD280在2.0左右。纯化得到总RN.A能够应用于RT：PCR反应。同样，用RNase消化金磁微粒一总核酸复合物可以得到基因组DNA，从10 mg大鼠肝脏中纯化得到约5 pg的DNA，OD260/OD280为1.78。此外，制备共价偶联oligo(dT)20功能化磁性微粒，并以此为载体，从总核酸中纯化mRNA，凝胶电泳结果可见清晰弥散的mRNA，没有rRNA的污染，以纯化得到的。mRNA作RT-PCR反应，能够扩增出目的条带。综上所述，本研究建立了以金磁微粒从动物组织中纯化总核酸(包括基因组DNA和总RNA)的方法。在不洗脱总核酸的前提下，以DNase处理金磁微粒.总核酸复合物，经过进一步纯化，可以得到总RaNA，以RNase处理金磁微粒.总核酸复合物，经过进一步纯化，可以得到基因组DNA。以得到的总核酸为样品，可以用oligo(dT)偶联的磁性微粒进行mRNA的纯化。基于金磁微粒的核酸纯化方法可重复，操作简单，选择性好，纯化得到的DNA或RNA纯度高，收率高，是一种非常有前景的新方法。