目的:我们前期研究发现14-3-3ζ在子宫腺肌病异位内膜组织中表达较对照内膜组织明显升高,然其能否真正促进子宫腺肌病的发生及其作用机制尚不清楚。拟通过细胞功能实验证实14-3-3ζ高表达能够促进子宫腺肌病发生;同时利用TAP纯化结合蛋白飞行质谱,筛选出异位子宫内膜间质细胞中14-3-3ζ差异配体蛋白质组,Co-IP证实其相互作用。方法:从子宫腺肌病患者中提取异位子宫内膜间质细胞进行培养、鉴定;采用半定量PCR、Western blot方法测定相应的mRNA、蛋白表达;构建14-3-3ζsiRNA,感染上述分离的子宫腺肌病子宫内膜间质细胞,流式细胞法测定细胞凋亡,CCK-8法测定细胞增值,Tranwell小室法检测细胞侵袭迁移以证实14-3-3ζ高表达在子宫腺肌病发生中的作用。TAP法分析子宫内膜间质细胞14-3-3ζ配体蛋白;质谱分析确认细胞中差异性高表达14-3-3ζ配体蛋白;Co-IP法确认14-3-3ζ与其配体蛋白MAP3K2之间的相互作用。结果:1.Western blot结果表明,子宫内膜异位间质细胞中14-3-3ζ蛋白表达较在位内膜间质细胞高;2.经siRNA干扰子宫腺肌病异位间质细胞后,细胞的增殖、迁移和侵袭能力减弱,细胞凋亡降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)3.经TAP纯化结合质谱分析鉴定出差异蛋白质组,选出与子宫腺肌病发生潜在相关的差异蛋白MAP3K2;4.Co-IP结果证实了14-3-3ζ和MAP3K2存在相互作用。结论:1.14-3-3ζ高表达可能通过增加细胞增殖、迁移和侵袭、抑制细胞凋亡而促进子宫腺肌症的发生;2.子宫腺肌病子宫内膜间质细胞中14-3-3ζ能够与MAP3K2相互作用,并可能与该病的发生有关。