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本实验在调查新疆草莓病毒病感染的基础上,对新疆草莓主要病毒病进行分子检测,并建立草莓主要病毒病原多重RT-PCR检测体系,为新疆无病毒草莓生产提供理论和技术支持。同时本实验采用‘红颜’、‘甜查理’和‘京藏香’三种草莓品种的茎尖为试验材料筛选其适合的初代、继代和生根培养基配方;通过热处理结合茎尖组培筛选出适合‘红颜’、‘甜查理’和‘京藏香’三种草莓品种脱毒的温度,研究内容如下:1、新疆草莓主要病毒分子检测利用已报道的4种草莓主要病毒病原4对特异性引物,分别对新疆主要草莓种植区随机采集草莓样品共450份样品,采用单一反转录PCR(RT-PCR)及多重PCR对采集的样品进行检测,分析新疆草莓病毒病的发生情况。检测结果发现感染新疆草莓有3种主要病毒。所有样品中病毒总检出率为64.22%;其中,SVBV检出率最高,为51.78%;SMoV检出率为23.78%,SMYEV检出率为9.33%,SCV没有检出。通过对复合侵染情况分析,病毒复合侵染率达18.45%,两种病毒病复合侵染检出率为16.67%,三种病毒病复合侵染检出率为1.78%;所有样品中对3种病毒的多重RT-PCR与单一RT-PCR检测结果一致,说明该多重RT-PCR检测方法可靠。多重RT-PCR采用20μl体系,所用SMoV(219 bp)、SMYEV(271 bp)、SVBV(574 bp)引物浓度分别为:0.4μl、0.35μl、0.25μl;最适退火温度为55℃。新疆草莓受SVBV、SMo V和SMYEV三种病毒危害,病毒病感染率总体较高,在草莓生产中需要生产中加强病毒检测和无病毒种苗的繁育。2、新疆草莓无病毒苗繁育体系建立(1)适合‘红颜’、‘甜查理’和‘京藏香’三个草莓品种的初代培养基分别为:‘红颜’MS+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA;‘甜查理’MS+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA;‘京藏香’MS+0.6 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IAA。(2)适合‘红颜’、‘甜查理’和‘京藏香’三个草莓品种的继代培养基分别为:‘红颜’MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA;‘甜查理’MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA;‘京藏香’MS+1.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA。(3)适合‘红颜’、‘甜查理’和‘京藏香’三个草莓品种的生根培养基为1/2MS+0.1mg/L IBA。(4)‘随着温度的不断升高成活率在不断下降,SMoV和SMYEV热处理容易脱除。‘红颜’、‘甜查理’和‘京藏香’三个草莓品种,热处理结合茎尖组培病毒病脱除率为100%的温度分别为:‘红颜’39℃热水中处理4个小时;‘甜查理’40℃热水中处理4个小时;‘京藏香’40℃热水中处理4个小时。