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目的:利用巴斯德毕赤酵母来表达抗人的CCL22以及CCL17免疫毒素,得到它们的单价以及双价免疫毒素,进行体外的功能验证以及单双价免疫毒素功能比较。方法:本试验利用毕赤酵母来生产抗人CCL22以及CCL17的单价和双价免疫毒素,需要经过两步纯化,第一步为镍柱纯化,第二步为离子柱纯化。利用SDS-PAGE凝胶电泳检测所得到免疫毒素分子量,最终Western Blot进一步鉴定蛋白。得到目的蛋白后,使用NHS-Sulfo生物素对其进行标记,以供流式细胞仪检测其与CCRF-CEM肿瘤细胞系的结合能力;使用3H同位素标记亮氨酸的方式检测两种单价免疫毒素对CCRF-CEM肿瘤细胞蛋白质合成的抑制能力;使用CellTiter-Glo试剂盒侦测CCRF-CEM肿瘤细胞中的ATP含量,来检测免疫毒素对其增殖的抑制作用。结果:本试验通过毕赤酵母成功表达了四种免疫毒素,即Anti-human CCL22单双价免疫毒素以及Anti-human CCL17单双价免疫毒素。这四种免疫毒素对CCRF-CEM肿瘤细胞均具有粘附能力,且双价免疫毒素的粘附能力大于单价免疫毒素;Anti-human CCL22及Anti-human CCL17的单价免疫毒素均能抑制CCRF-CEM肿瘤细胞蛋白质合成,且后者的抑制能力强于前者;所有免疫毒素对CCRF-CEM肿瘤细胞活力均具有抑制作用,且双价体的效力大于单价体。结论:本试验成功表达了抗人的CCL22以及CCL17的单价及双价共计四种免疫毒素,它们对于CCRF-CEM肿瘤细胞均具有粘附及增殖抑制作用,其中双价免疫毒素效果较为明显,这些结果可以为日后的癌症与肿瘤治疗提供一定的理论基础。