康莱特对肝癌细胞Hepa1-6的抑制作用

来源 :山西医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:sunzheng_1985
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目的:探讨康莱特(KLT)注射液在不同作用时间以及不同浓度下对肝癌细胞Hepa1-6增殖和凋亡的影响,为其应用于肝癌的临床治疗提供理论依据。方法:分别设计阴性对照组(A组),不同浓度KLT组B(10mL/L)、C(20mL/L)、D(30mL/L)、E(40mL/L)、F(50mL/L)对肝癌细胞Hepa1-6进行培养。在KLT不同药物浓度及不同时间作用下,观察细胞毒试验(MTT法)对肝细胞癌Hepa1-6细胞的生长抑制率,并筛选出最佳实验浓度。取对数生长期细胞培养48h后,经苏木精-伊红染色,光镜下观察不同药物浓度对细胞结构变化及细胞传代试验影响。流式细胞仪检测不同浓度药物作用后Hepa1-6细胞凋亡情况。结果:1.通过MTT法观察,在KLT药物作用时间渐延长、浓度逐渐增加的情况下,其肿瘤细胞的增殖也逐渐受到抑制。且以KLT注射液B、D、F组作用时细胞的抑制率更明显,因此后续实验选用这三种药物浓度进行。2.光镜下观察,对照组细胞形态多呈不规则,细胞的足长且多,核分裂相和瘤巨细胞满视野。而KLT注射液B、D、F组,在药物浓度逐渐增加的情况下,细胞的形态逐渐发生变化,变圆、变小,伪足回缩良好,细胞轮廓的清晰度渐增强,瘤巨细胞及核分裂相逐渐变少。通过观察传代实验发现,对照组细胞增殖旺盛,1-2天铺满且贴壁牢固。而药物作用后,在药物浓度增加的情况下,细胞的生长能力逐渐减慢,传代能力渐下降甚至有的细胞停止传代,呈现细胞悬浮现象。3.流式细胞仪检测表明,Hepa1-6在不同浓度KLT作用48h后,随着药物浓度的增加,细胞凋亡率渐增加,且各药物组与对照组比较、差异均有统计学意(P<0.01);各药物组间进行比较,差异也均有统计学意义(P<0.01)。结论: KLT可能是通过抑制肿瘤细胞增殖和诱导肿瘤细胞凋亡来达到对肝癌细胞Hepa1-6抑制作用。
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