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Ghrelin(生长激素促泌素受体激动剂,胃促生长素)是1999年Kojima等从大鼠胃中发现的生长激素促分泌素受体的第1个具有生物学活性的内源性配体,是由28个氨基酸组成的小分子多肽,第3位丝氨酸上有酰化基团,该基团对于其生理活性很重要。与其受体GHSR结合后可以促进生长激素的分泌。Ghrelim主要合成于胃,约为60-70%,部分产生于肠、垂体、肾、胎盘及下丘脑。血浆中的Ghrelin水平呈节律性变化,在禁食、饭前和夜间其量增加,而摄食后会显著下降。Ghrelin在体内通过旁分泌,自分泌和内分泌的方式促进胃酸和生长激素(GH)等多种内分泌激素的分泌,在心血管系统、能量代谢、细胞增殖、免疫系统等多个方面发挥生物学作用。在消化系统方面具有促进摄食和胃酸分泌,促进胃肠动力,保护消化系统粘膜等作用。在临床工作中各种疾病导致的胃大部切除术后患者多有胃轻瘫胃蠕动无力、食欲减退、体重减轻,并易发厌食症、术后吻合口破裂或漏等严重并发症,严重影响其术后的恢复和今后的生活质量。
本研究采用外源性生长激素促泌素受体激动剂ghrelin或生理盐水作为对照分别作用于早期(术后7天内)胃大部切除术(毕Ⅰ式吻合术)后大鼠,测定大鼠术前及术后1到7天每日摄食量,累积摄食量和体重值的变化,在术后第3、7天颈椎脱臼法处死大鼠后,剪取吻合口周围组织通过微量注射泵及生物信号采集处理系统测量该段吻合口爆破压,并应用酶联免疫吸附试验(ELISA法)测量吻合口组织中羟脯氨酸含量,了解生长激素促泌素受体激动剂ghrelin对大鼠术后早期恢复的影响。在术后第3、7天通过酚红灌胃测量大鼠术后的胃液相排空率以了解ghrelin对大鼠术后胃动力的影响,在术后第7天处死大鼠后同时剪取残余胃底组织,应用免疫组化和实时荧光定量PCR方法测定ghrelin蛋白和ghrelin mRNA的相对表达量以了解早期应用外源性ghrelin对大鼠术后早期代偿作用的影响。
结果:Ghrelin组大鼠和生理盐水组大鼠之间术前及术后1-7天体重的差异均无统计学意义(P>0.05)。Ghrelin组大鼠在术后第3、7天的每日摄食量高于对照组大鼠(P<0.05),其他天两组大鼠无差异。Ghrelin组大鼠术后7天的累积摄食量为(52.50±6.77)g,明显高于生理盐水组大鼠(45.67±7.47)g,P<0.05。Ghrelin组大鼠术后第3天吻合口爆破压力为94.04±6.90mmHg,Saline组大鼠术后第3天的吻合口爆破压力为77.83±5.71mm Hg,P<0.05。Ghrelin组大鼠术后第3天吻合口羟脯氨酸含量为0.43±0.28μg/mg wet tissue,saline组大鼠术后第3天的吻合口羟脯氨酸含量为0.394±0.11μg/mg wet tissue,P<0.01,术后第7天Ghrelin组大鼠吻合口爆破压为(172.33±10.44)mm Hg,明显高于生理盐水组(155.834±6.62)mm Hg,P<0.05。同样,术后第7天Ghrelin组大鼠羟脯氨酸含量为(0.50±0.29)μg/mg wet tissue,明显高于生理盐水组大鼠(0.43±0.48)μg/mg wet tissue,P<0.01。与正常SD大鼠的胃排空率(GE%)[(37.82±2.97)%]比较,胃大部切除大鼠术后第3天,生理盐水组大鼠胃排空率为(41.28±2.01)%(P<0.05),ghrelin组大鼠胃排空率为(44.25±3.92)%(P<0.05),但两组大鼠间胃排空率无差异(P>0.05);同样与正常大鼠比较,胃大部切除大鼠术后第7天,生理盐水组大鼠胃排空率为(44.58±3.53)%(P<0.05),ghrelin组大鼠胃排空率为(51.21±3.32)%(P<0.05),两组大鼠胃排空率也无统计学差异(P>0.05)。术后第7天Ghrelin组大鼠胃底ghrelin免疫阳性细胞光密度值为72±2.68,生理盐水组大鼠胃底ghrelin免疫阳性细胞光密度值为78±4.20,两组间差异P<0.05:同样Ghrelin组大鼠残余胃底组织ghrelinmRNA相对表达量为0.08±0.04,明显低于生理盐水组大鼠(0.22±0.68),P<0.01。
以上结果提示:生长激素促泌素受体激动剂ghrelin能有效提高胃大部切除术后大鼠摄食及吻合口愈合,促进胃大部切除术后大鼠的早期恢复,并且并不加快毕Ⅰ式吻合术后胃排空速率。同时外源性ghrelin的摄入抑制了机体早期胃底组织的负反馈性代偿作用。