耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性及分型研究

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目的:了解襄阳地区临床分离MRSA的SCCmec基因分型、PVL毒素基因携带情况、耐药特征及遗传背景,并分析相关临床病历资料,为探索耐药机制、指导临床治疗、合理使用抗生素及防控提供依据。  方法:1、收集襄阳地区4所医院临床分离的80株SA非重复菌株,采用传统鉴定法、苯唑西林纸片扩散法、头孢西丁纸片扩散法、PCR法检测mecA基因鉴定出43株MRSA;2、采用多重PCR法对43株MRSA的SCCmec基因进行分型,采用PCR法对PVL基因进行检测;3、运用全自动细菌鉴定系统测定43株MRSA对临床常用25种抗生素的MIC值,使用万古霉素E试验条检测细菌对万古霉素的MIC值,采用Whonet5.5对结果进行统计;4、运用脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术对43株MRSA进行分子分型研究。5、利用统计学软件SPSS11.5对本实验收集的80株SA进行临床病历资料统计分析。  结果:1、经鉴定的43株MRSA多重PCR法检测显示:39株SCCmecⅢ型,4株SCCmecIVa型;PCR法检测显示:8株PVL基因阳性,SCCmecⅢ型菌株PVL基因携带率为10.3%(4/39),SCCmecⅣa型PVL基因携带率为100%(4/4)。2、对25种抗生素的药敏检测发现,对SXT敏感率为76.2%(38/43),MNO敏感率为83.7%(36/43),TEL、LZD、VAN敏感率为100%(43/43);43株MRSA均为多重耐药株,多重耐药形式有A、B、C、D、E五种,其中 C类为主要耐药形式,具体表现为对青霉素类、头孢菌素类、大环内酯类、林可酰胺类、四环素类、β内酰胺酶抑制剂复合物类、碳青霉烯类、氟喹诺酮类、氨基糖苷类、安沙霉素类10种抗菌药物共同耐药,约占53.5%。此外,43株MRSA显示有9.3%(4/43)对万古霉素的MlC为2.0μg/ml。3、43株MRSA共有A、B、C、D、E五种PFGE分型,以A型最多,共31株(72.1%),是本地区流行株,在4所医院均分离到A型菌株。A型又分为A1~A3三种亚型,以A1型为主,共18株(41.9%),是主要的流行克隆株;4、MRSA阳性率差异在不同性别、年龄、标本来源、科室分布方面无统计学意义。  结论:1、襄阳地区MRSA以SCCmecⅢ型为主,PVL基因携带率高。2、襄阳地区MRSA多重耐药严重,未发现万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药株。3、虽然本地区不存在万古霉素MIC漂移现象,但所检MIC=2ug/ml的菌株占9.3%(4/43),提示应加强防控监测。4、PFGE结果表明襄阳地区以A型MRSA较普遍,以A1亚型克隆株为主,相同克隆株在医院内和医院之间的传播是MRSA广泛流行的重要原因。
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