目的: 构建含人肿瘤坏死因子相关调亡诱导配体(human TNF-Related Apoptosis Inducing Ligand,hTRAIL)和萤火虫荧光素酶(firefly luciferase,LUC)的腺病毒载体,为用影像学方法在活体上间接监测治疗基因hTRAIL 的表达奠定基础。方法: 用Bgl II 和XbaI 酶切质粒PDC-LUC 后,回收1700bp 大小LUC 的DNA 片段;用BamH I 和XbaI 酶切含内核糖体进入位点( interal ribosoe entry site, IRES)基因的质粒Pclon5 后,回收其线性化片段。用T4 DNA 连接酶连接上述两片段,LUC 基因就插入到Pclon5 的IRES 基因的下游,命名为Pclon5-LUC。Pclon5-LUC 用Kpn I 和Xba I 酶切鉴定。将Pclon5-LUC 用Bgl II 和XbaI 酶切,回收IRES-LUC基因,与用BamHI/SpeI 酶切后线性化的Pclon9 连接,获得含多克隆位点的Pclon9.5-LUC,先用EcoR I 与Age I 酶切鉴定,再用Sca I 酶切鉴定。Pclon9.5-LUC 用EcoRI 和Xho I 酶切,回收含多克隆位点IRES-LUC基因片段。PDC312-CMV用EcoRI和Sal I酶切,回收线性化片段,将含多克隆位点的IRES-LUC 基因片段插入到PDC312-CMV 中两个绝缘子中间, 即PDC312-CMV-9.5-LUC,用Pst I 酶切鉴定。将PDC312-CMV-9.5-LUC 用EcoRI 和SalI 酶切,回收线性化片段;PDC-humanTRAIL 用EcoRI 和SalI 酶切,回