目的建立白花前胡甲素的高效液相色谱（HPLC）、高效液相质谱联用（LC-MS）分析方法。并用所建立的LC-MS、HPLC检测方法分别进行白花前胡甲素体内和体外的代谢以及血浆蛋白结合率的研究,为药物的临床应用研究提供药物动力学资料。方法以香豆素为内标物建立LC-MS分析方法,色谱柱为Hypersil ODS2柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为甲醇-水-乙酸（75:25:0.1）,流速为1000μL·min^-1,柱温为25℃,进样量为30μL。采用电喷雾电离源,选择反应监测（MRM）方式进行正离子检测。给健康雄性Wistar大鼠静脉注射和口服灌胃白花前胡甲素5mg·kg^-1后用所建立的LC-MS法测定不同时间的血浆药物浓度,并采用WinNonlin药物动力学软件中非房室模型分析方法对血药浓度-时间数据进行处理。以华蟾毒精为内标物,采用Hypersil-C₁₈（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,以甲醇-水（75:25）为流动相,流速1000μL·min^-1,检测波长321 nm,柱温25℃,进样量20μL。超速离心法制备大鼠肝微粒体,HPLC法测定孵育液中白花前胡甲素原形药物的浓度,研究白花前胡甲素的酶促动力学,同时观察不同浓度肝微粒体蛋白对白花前胡甲素代谢的影响,并采用透析法研究白花前胡甲素的血浆蛋白结合率。结果LC-MS检测白花前胡甲素在大鼠血浆中的浓度,其检测限为1 ng·mL^-1,白花前胡甲素浓度在1～1000 ng·mL^-1范围内与峰面积呈现良好的线性关系（r=0.9999）;准确度为92.2%～106.0%;日内、日间精密度分别为2.1%～8.2%、2.8%～5.9%。静脉注射白花前胡甲素5 mg·kg^-1的药动学参数:t_1/2:（10.71±0.27）h;CL:（1.09±0.04）L·h^-1;V_Z:（16.78±0.95）L;AUC_inf:（1152.40±46.86）ng·（h·mL）^-1。口服灌胃Pd-Ia 5 mg·kg^-1的药动学参数:t_1/2:（9.94±1.27）h;CL:（1.51±0.14）L·h^-1;V_Z:（21.57±0.83）L;AUC_inf:（828.95±74.47）μg·（h·mL）^-1。HPLC法检测白花前胡甲素,浓度在1～100μg·mL^-1范围内与峰面积呈现良好的线性关系（r=0.9989）,日内RSD为2.3%～7.4%;日间RSD为8.0%～14.5%;萃取回收率为98.4%;白花前胡甲素在肝微粒体中呈线性消除,消除速率不随药物底物浓度的增加而增加,t_1/2为（41.74±10.71）min;C_max为（57.22±3.27）μg·mL^-1;CL为（0.0034±0.0199）mL·（min·mg）^-1。白花前胡甲素与大鼠血浆蛋白的结合率范围为80.23%～92.83%。结论本文建立的LC-MS方法操作简单、灵敏、特异,结果准确,适合用于白花前胡甲素大鼠体内药代动力学研究。白花前胡甲素吸收慢,生物利用度高。本文建立的HPLC方法操作简单、灵敏、特异,结果准确;白花前胡甲素在大鼠肝微粒体中呈线性消除,消除速率随微粒体蛋白含量的减小而降低,为NADPH所介导的代谢。白花前胡甲素与大鼠血浆蛋白的结合率范围为80.23%～92.83%,血浆蛋白结合率随浓度的增加而增加,属于高血桨蛋白结合率药物。