儿童肺炎链球菌耐药性与耐药基因分型研究

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目的:了解山西省儿童医院住院部分别从痰、脑脊液、血、肺泡灌洗液标本中分离出的肺炎链球菌对β-内酰胺类、红霉素、四环素类抗生素的耐药性及其相关的耐药基因分型,为临床规范使用抗生素提供一定参考依据。方法:收集山西省儿童医院2015年10月-2018年1月住院患儿不同标本(痰、脑脊液、血、肺泡灌洗液),利用培养基分离肺炎链球菌,全自动细菌鉴定/药敏系统进行细菌鉴定及药敏检测,细菌的DNA提取则采用有上海生工生物有限公司提供的核酸提取试剂盒,对相关耐药基因pbp2B、ermB、mefA、tetM进行PCR扩增,最后所得产物进行琼脂糖凝胶电泳定性观察。结果:已分离的肺炎链球菌菌株共计100珠,分别来自痰培养52例,占全部标本的52%,脑脊液培养14例,占全部标本14%,血培养26例,占全部标本26%,肺泡灌洗液培养8例,占全部标本的8%,其中检测出红霉素耐药菌株94珠,耐药率最高,达94.0%,检测出四环素耐药菌株91珠,耐药率为91.0%,检测出青霉素耐药菌株5珠,耐药率为5%;四种耐药基因中的pbp2B、ermB、mefA、tetM检测中:在青霉素耐药的5株SP中检测出有pbp2B基因的有4株(80.0%);在红霉素耐药的94株SP中检测出:有ermB基因的有82株(87.2%),有mefA的有48株(51.1%),而同时有ermB基因和mefA基因的有38株(40.4%);分离出的对四环素耐药的91株SP中检测出有tetM基因的有81株(89.0%)。结论:本次实验显示了从山西省儿童医院住院患儿痰、脑脊液、血、肺泡灌洗液不同标本中分离出的肺炎链球菌对红霉素、四环素的耐药性相对较高;青霉素的耐药率相对不高,考虑与青霉素耐药基因表达的氨基酸突变有关,提示青霉素仍可作为链球菌感染的首选用药。山西省儿童医院住院患儿不同标本中分离出的SP对青霉素的耐药主要由基因pbp2B介导,虽然近年来的各地研究证实基因ermB、mefA同时存在导致耐药的比率在逐渐增加,但SP对大环内酯类抗生素的耐药性主要决定因素还是ermB基因,SP对四环素的高耐药性是由tetM基因介导的。临床上对肺炎链球菌感染时的治疗应结合当地细菌分布特点及相应的药敏试验结合恰当使用有效抗生素,避免本地耐药菌株的进一步增加。
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