黄曲霉A5P1的固定化及其脱色糖蜜酒精废水的初步研究

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糖蜜酒精废水(MSW)是一类成分复杂、含有大量难降解的大分子色素物质的环境污染物,采用传统生物法处理的效果往往不理想,固定化细胞技术是提高生物脱色效率的可行途径之一。本文利用实验室筛选获得的1株黄曲霉A5P1(Aspergillus flavus)开展菌株固定化及固定化细胞反应器脱色糖蜜酒精废水的研究,以期为提高糖蜜酒精废水的脱色处理提供新策略。论文研究内容主要包括:(1)首先确定适用于黄曲霉A5P1生物脱色的糖蜜酒精废水浓度及时间;(2)选择几种代表性的天然有机材料和无机材料进行菌株固定化,考察不同固定化细胞的脱色情况,从而筛选出与脱色体系相匹配的载体材料;(3)选择丝瓜络为固定化载体,对其固定化细胞的制备以及糖蜜酒精废水脱色进行条件优化;(4)构建固定化细胞反应器对糖蜜酒精废水进行脱色试验。实验结果表明,黄曲霉A5P1适宜处理浓度为2%的糖蜜酒精废水,浓度增大将不利于菌株生长,导致脱色率下降。在此浓度下,菌株的脱色率与细胞干重分别为47.62%和0.65g。天然有机材料载体相对于无机材料载体更适合于菌体生长和脱色,而且具有大孔隙率的载体固定化菌株的效果优于小空隙率载体。确定丝瓜络为最适固定化载体,最优脱色工艺条件为:初始pH为5.0,培养温度39℃,转速150r·min-1,接种浓度4.3×104spores· ml-1时,2g丝瓜络/60mL,此条件下单位载体获得的固定化细胞量为0.3385g(细胞干重),对2%的糖蜜酒精废水的脱色率为65.68%,载体丝瓜络和菌丝球自身对废水的吸附脱色率分别为4%和7.1%。研究发现,固定化可促进细胞生长,菌株的最大产H202速率和脱色率增加,固定化细胞的4天脱色率比游离细胞提高约14%。结果初步表明,固定化可增强菌体的生长代谢活力,使单位质量的固定化菌体对脱色率和产过氧化氢活力均高于游离菌体,固定化菌体的生长有促进作用和稳固作用。固定化菌体可重复使用4次,脱色率维持在50%以上。构建了丝瓜络固定化细胞生物反应器处理糖蜜酒精废水脱色,考察营养浓度、模拟废水、不同浓度模拟废水的脱色情况。由于糖蜜酒精废水营养丰富,反应器稳定运行10天后即出现染菌现象,pH值显著下降;以从废水中提取的色素物质配制模拟废水为进水,反应器可稳定运行约25天,前18天可保持50%的脱色率。当提高模拟废水浓度由A475nnm=3.5至A475nm=4.0,脱色率为35%左右。实验结果初步表明,固定化细胞对糖蜜酒精废水脱色具有一定促进作用。
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