【摘 要】
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目的:探讨缬沙坦（Valsartan）对宫颈癌细胞的生物学作用及其相关机制,为ARBs作为抗肿瘤药物的临床应用提供实验依据。方法:1.体外培养宫颈癌Hela细胞,实验组设置缬沙坦浓度为0.1μmol/L、1μmol/L、10μmol/L和100μmol/L,对照组为不含缬沙坦的等体积培养液,分别培养Hela细胞0、24、48h,通过CCK-8法检测缬沙坦对Hela细胞的增殖能力的影响。2.根据CC
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目的:探讨缬沙坦（Valsartan）对宫颈癌细胞的生物学作用及其相关机制,为ARBs作为抗肿瘤药物的临床应用提供实验依据。方法:1.体外培养宫颈癌Hela细胞,实验组设置缬沙坦浓度为0.1μmol/L、1μmol/L、10μmol/L和100μmol/L,对照组为不含缬沙坦的等体积培养液,分别培养Hela细胞0、24、48h,通过CCK-8法检测缬沙坦对Hela细胞的增殖能力的影响。2.根据CCK-8实验结果选取合适的药物浓度,实验组使用100μmol/L缬沙坦培养Hela细胞,对照组使用不含缬沙坦的培养液培养Hela细胞。分别使用划痕愈合实验和Transewell实验检测缬沙坦对Hela细胞迁移及侵袭作用的影响。3.实验组分别使用10μmol/L、100μmol/L的缬沙坦培养Hela细胞,对照组用不含缬沙坦的培养液培养Hela细胞,共培养24h。使用Western blot实验检测缬沙坦对Hela细胞中PI3K/AKT信号通路中PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达的影响。4.为进一步验证缬沙坦对Hela细胞的生物学作用的相关机制,在一实验组的Hela细胞中加入AKT激动剂（SC79）预处理1h后,再加入100μmol/L的缬沙坦培养Hela细胞。另一实验组仅加入100μmol/L的缬沙坦培养细胞,对照组则设置为细胞培养液。分别通过CCK-8实验检测增殖能力、划痕愈合实验和Transewell侵袭实验检测转移能力。结果:1.通过CCK-8实验显示,使用缬沙坦为0.1μmol/L、1μmol/L、10μmol/L和100μmol/L的实验组中,在0h时,各组细胞的OD值与对照组相比,p>0.05,差异无统计学意义。在处理时间为24h和48h时,当使用含0.1μmol/L、1mol/L的缬沙坦培养Hela细胞的OD值,与对照组相比,p>0.05,差异无统计学意义;在缬沙坦为10μmol/L和100μmol/L的处理组的细胞OD值,与对照组相比,p<0.01,差异有统计学意义。2.通过划痕愈合实验和Transewell侵袭实验表明,当缬沙坦浓度为100μmol/L时,细胞迁移率为与对照组相比,p<0.01,差异有统计学意义。实验组中穿过小室细胞的数目与对照组相比,差异有统计学意义,p<0.01。3.Western blot实验表明,p-PI3K、p-AKT在缬沙坦10、100μmol/L实验组中的表达量,与对照组相比,仅100μmol/L实验组有统计学意义,p<0.05。而10μmol/L实验组差异无统计学意义,p>0.05。各实验组中PI3K、AKT的表达量与对照组相比,差异均不具有统计学意义（p>0.05）。4.加入AKT激动剂（SC79）和缬沙坦组培养24、48h后,CCK-8实验显示,各组细胞的OD值与对照组相比,p>0.05,差异无统计学意义。在划痕愈合实验和Transewell侵袭实验中,加入AKT激动剂和缬沙坦组实验组细胞迁移率和穿过小室细胞数分别,与对照组相比,p>0.05,差异均无统计学意义。结论:缬沙坦抑制宫颈癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力,这种作用可能是通过影响PI3K/AKT信号通路的激活实现的。
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