【摘 要】
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目的:本研究拟探索在二氧化硅的暴露背景下,经NETs的反复免疫刺激,能否引起大鼠机体的免疫激活和诱导出MPO-ANCA的产生,进一步揭示硅暴露与AAV之间的因果关系。方法:经大鼠气管内注入二氧化硅混悬液的方法建立硅暴露大鼠模型,用NETs联合弗氏佐剂反复刺激硅暴露大鼠。分为正常对照组（N组,n=5）、正常大鼠+NETs刺激组（N+NETs组,n=5）、硅暴露模型组（S组,n=5）、硅暴露模型+NE
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目的:本研究拟探索在二氧化硅的暴露背景下,经NETs的反复免疫刺激,能否引起大鼠机体的免疫激活和诱导出MPO-ANCA的产生,进一步揭示硅暴露与AAV之间的因果关系。方法:经大鼠气管内注入二氧化硅混悬液的方法建立硅暴露大鼠模型,用NETs联合弗氏佐剂反复刺激硅暴露大鼠。分为正常对照组（N组,n=5）、正常大鼠+NETs刺激组（N+NETs组,n=5）、硅暴露模型组（S组,n=5）、硅暴露模型+NETs刺激组（S+NETs组,n=6）。刺激结束后检测大鼠肺、肾组织病理改变,应用免疫荧光染色和免疫荧光显微镜观察肺、肾组织NETs表达和定位。ELISA法检测血清中髓过氧化物酶（MPO）-ANCA、血清瓜氨酸化组蛋白H3（CitH3）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素17（IL-17A）。结果:（1）大鼠HE染色切片显示,S+NETs组大鼠肺组织可见肺泡壁增厚和炎性细胞浸润,肺泡腔内有大量粒细胞和红细胞渗出,提示肺泡出血。S组有特征性的肺部巨噬细胞和中性粒细胞浸润状态,无肺出血。N组和N+NETs组肺组织未见异常。S+NETs组大鼠肾小球和肾小管可见少量炎性细胞浸润、肾髓质局部可见淤血。S组、N+NETs组及N组的肾组织皆未见明显异常。（2）免疫荧光显微镜观察显示,与其他三组相比,S+NETs组的免疫荧光强度较其他三组明显增高,提示S+NETs组的NETs沉积量明显增加。（3）ELISA法检测显示,S+NETs组大鼠血清CitH3、IL-17A和TNF-α水平较另外三组明显增高（均P<0.05）。MPO-ANCA虽未见显著性差异,但已呈现升高的趋势。（4）经Pearson相关性分析,血清IL-17A、CitH3以及TNF-α三个指标间均呈显著强正相关关系（r>0.6,P<0.05）。结论:二氧化硅暴露背景可诱导大鼠机体处于免疫微环境的状态,机体经NETs反复刺激可激活免疫炎症反应,产生多种细胞因子,这些因子参与了机体免疫反应。为今后探索硅暴露与AAV的关系提供了证据线索。
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